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2024年11月08日 10:01通派(上海)生物科技有限公司點擊量:14
細胞:MKN-28細胞
中文名稱:人胃癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
MKN-28細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂?。┤サ魕i酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
Twist1基因與Velcro蛋白相互作用在上皮細胞轉(zhuǎn)移中具有重要作用
為了能夠遷移,腫瘤細胞已經(jīng)開始與腫瘤外的蛋白相互作用,(通派細胞庫供應(yīng):LS180細胞)并最終獨自發(fā)揮作用。當刪除E-鈣粘蛋白后,上皮細胞開始與凝膠中的更多蛋白相互作用,但它們并沒有失去與其余乳組織。
實驗中打開一個稱為Twist1的基因,(通派細胞庫供應(yīng):HK-2細胞)被認為能影響許多基因的活性,而靜止的上皮細胞到獨立的活動細胞之間的轉(zhuǎn)化必需這些基因。
發(fā)現(xiàn)在打開Twist1的24小時內(nèi),(通派細胞庫供應(yīng):Colo201細胞)許多單細胞開始移動越過上皮邊界,進入凝膠之外。此外,當在活小鼠中重復(fù)實驗時,得到了相似的結(jié)果。
當他們使缺乏E-鈣粘蛋白的上皮細胞打開Twist1時,(通派細胞庫供應(yīng):NS-3細胞)這些細胞再也不能作為單個細胞逸入凝膠。相反,它們產(chǎn)生了許多列細胞,這些細胞不能從乳組織中分離。
結(jié)果表明,Twist1誘導的單細胞分離和遷移,(通派細胞庫供應(yīng):HCC38細胞)實際上需要E-鈣粘蛋白的存在——這個Velcro蛋白幫助細胞結(jié)合在一起。
Twist1能影響許多基因的活性,(通派細胞庫供應(yīng):NG108-15細胞)因此探尋這些基因中的哪一個引起了他們看到的細胞傳播。有了這些信息,希望能找到防止癌癥轉(zhuǎn)移的新方法。目標是改善轉(zhuǎn)移性乳癌患者的預(yù)后;
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