2024年12月18日 16:58南京信帆生物技術有限公司點擊量：36
人卵巢癌抗原（CA125）檢測原理
背景介紹：
CA-125（癌抗原-125或糖鏈抗原-125），也被稱為粘蛋白-16，是被MUC16基因所編碼的蛋白質，是從上皮性卵巢癌抗原檢測出可被單克隆抗體OC125結合的一種糖蛋白。來源于胚胎發育期體腔上皮，在正常卵巢組織中不存在。CA125是一種位于染色體19p13．2區域，并含有5797個堿基對的跨膜糖蛋白，屬于IgG1。由于其氨基酸序列具有一些黏蛋白分子的特性，故將其命名為CA125（基因為MUC16），而且通過轉染技術已經證實MUC16就是CA125。CA125相對分子質量為20萬～100萬，為高分子糖蛋白，外形呈環行結構，含24%的糖類，是一種類似黏蛋白的糖蛋白復合物，屬于IgG。
檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人卵巢癌抗原（CA125）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人卵巢癌抗原（CA125）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
操作注意:
1. 嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。所有液體組分使用前充分搖勻。
2. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經變藍的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
9. 不能使用過期產品。
10. 如果樣本可能傳播疾病，所有的樣品都應管理好，按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。
試劑盒性能
1. 檢測范圍：2 U/mL – 64 U/mL。
2. 靈敏度：最低檢測濃度小于0.1 U/mL。
3. 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
重復性：板內變異系數小于10% ，板間變異系數小于15%
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