
2025年02月09日 13:25通派(上海)生物科技有限公司點擊量:80
細胞:HepG2細胞
中文名稱:人肝癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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對囊性纖維化患者的相同致病菌的治療,在其肺部的一個區域可能有效,但在其他區域可能并非如此。
細菌在患者肺部的不同區域被分隔開來,并進化出不同的區域特異性。
研究人員發現了細菌營養需求量、宿主防御和抗菌素耐藥性等方面的差異。這些結果暗示,其他感染也可能產生類似的細菌多樣性。
為了弄清慢性細菌如何在抗菌素和免疫系統的雙重壓力下仍持續存在,解剖了通過肺移植術從囊性纖維化患者身上移除的肺,并從不同的肺部區域收集了數千個假單胞菌樣本。
該研究小組發現,雖然所有的假單胞菌都是一個單一菌株的后代,但每個肺部區域包含了大量功能各異的“親屬”假單胞菌。
寄居在不同肺部區域的細菌在抗菌素耐藥性和毒性方面的差別非常大。這些差異將影響患者健康。
研究人員分析了這種細菌的遺傳代碼,DNA序列顯示,這些差異的出現是由于細菌細胞被孤立在肺部的不同區域,然后發生局部進化,就像達爾文發現的加拉帕戈斯群島雀鳥的進化。
DNA序列還表明,細菌經過數年甚至數十年進化出的這些特點,可能持續存在于細菌寄居的不同肺部區域,并能提供有關過去條件和治療的“記憶”,以幫助假單胞菌更強壯。
即便當單一菌株引發感染時,人類器官進化也能產生不同的相關細菌家族。這可能是讓治療十分困難的部分原因,當對一類壓力敏感的細菌被殺死后,功能不同的兄弟細菌就占據了它們的地盤。
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