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【技術(shù)說(shuō)明】凝膠滲透色譜GPC與凝膠過(guò)濾色譜GFC

2025年03月10日 10:58上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司點(diǎn)擊量:1

凝膠滲透色譜(Gel Permeation Chromatography,GPC)是1964年,由J.C.Moore首先研究成功。不僅可用于小分子物質(zhì)的分離和鑒定,而且可以用來(lái)分析化學(xué)性質(zhì)相同分子體積不同的高分子同系物(聚合物在分離柱上按分子流體力學(xué)體積大小被分離開(kāi)),優(yōu)點(diǎn)是:保留時(shí)間短,色譜峰窄,容易檢測(cè)等。

凝膠色譜法又叫凝膠色譜技術(shù),是六十年代初發(fā)展起來(lái)的一種快速而又簡(jiǎn)單的分離分析技術(shù),由于設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便,不需要有機(jī)溶劑,對(duì)高分子物質(zhì)有很高的分離效果。凝膠色譜法又稱分子排阻色譜法。

技術(shù)介紹

凝膠色譜法又叫凝膠色譜技術(shù),是六十年代初發(fā)展起來(lái)的一種快速而又簡(jiǎn)單的分離分析技術(shù),由于設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便,不需要有機(jī)溶劑,對(duì)高分子物質(zhì)有很高的分離效果。凝膠色譜法又稱分子排阻色譜法。凝膠色譜法主要用于高聚物的相對(duì)分子質(zhì)量分級(jí)分析以及相對(duì)分子質(zhì)量分布測(cè)試。根據(jù)分離的對(duì)象是水溶性的化合物還是有機(jī)溶劑可溶物,又可分為凝膠過(guò)濾色譜(GFC)和凝膠滲透色譜(GPC)。GFC一般用于分離水溶性的大分子,如多糖類化合物。凝膠的代表是葡萄糖系列,洗脫溶劑主要是水。凝膠滲透色譜法主要用于有機(jī)溶劑中可溶的高聚物(聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等)相對(duì)分子質(zhì)量分布分析及分離,常用的凝膠為交聯(lián)聚苯乙烯凝膠,洗脫溶劑為四氫呋喃等有機(jī)溶劑。凝膠色譜不但可以用于分離測(cè)定高聚物的相對(duì)分子質(zhì)量和相對(duì)分子質(zhì)量分布,同時(shí)根據(jù)所用凝膠填料不同,可分離油溶性和水溶性物質(zhì),分離相對(duì)分子質(zhì)量的范圍從幾百萬(wàn)到100以下。近年來(lái),凝膠色譜也廣泛用于分離小分子化合物。化學(xué)結(jié)構(gòu)不同但相對(duì)分子質(zhì)量相近的物質(zhì),不可能通過(guò)凝膠色譜法達(dá)到wan全的分離純化的目的。凝膠色譜主要用于高聚物的相對(duì)分子質(zhì)量分級(jí)分析以及相對(duì)分子質(zhì)量分布測(cè)試。已經(jīng)被生物化學(xué)、分子生物學(xué)、生物工程學(xué)、分子免疫學(xué)以及醫(yī)學(xué)等有關(guān)領(lǐng)域廣泛采用,不但應(yīng)用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究,而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。

基本原理

分子篩效益

兩種全排阻的分子即使大小不同,也不能有分離效果。直徑比凝膠最小孔直徑小的分子能進(jìn)入凝膠的全部孔隙。如果兩種分子都能全部進(jìn)入凝膠孔隙,即使它們的大小有差別,也不會(huì)有好的分離效果。因此,一定的分子篩有它一定的使用范圍。綜上所述,在凝膠色譜中會(huì)有三種情況,一是分子很小,能進(jìn)入分子篩全部的內(nèi)孔隙;二是分子很大,wan全不能進(jìn)入凝膠的任何內(nèi)孔隙;三是分子大小適中,能進(jìn)入凝膠的內(nèi)孔隙中孔徑大小相應(yīng)的部分。大、中、小三類分子彼此間較易分開(kāi),但每種凝膠分離范圍之外的分子,在不改變凝膠種類的情況下是很難分離的。對(duì)于分子大小不同,但同屬于凝膠分離范圍內(nèi)各種分子,在凝膠床中的分布情況是不同的:分子較大的只能進(jìn)入孔徑較大的那一部分凝膠孔隙內(nèi),而分子較小的可進(jìn)入較多的凝膠顆粒內(nèi),這樣分子較大的在凝膠床內(nèi)移動(dòng)距離較短,分子較小的移動(dòng)距離較長(zhǎng)。于是分子較大的先通過(guò)凝膠床而分子較小的后通過(guò)凝膠床,這樣就利用分子篩可將分子量不同的物質(zhì)分離。另外,凝膠本身具有三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),大的分子在通過(guò)這種網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)上的孔隙時(shí)阻力較大,小分子通過(guò)時(shí)阻力較小。分子量大小不同的多種成份在通過(guò)凝膠床時(shí),按照分子量大小“排隊(duì),凝膠表現(xiàn)分子篩效應(yīng)。

重要參數(shù)

⑴柱體積:柱體積是指凝膠裝柱后,從柱的底板到凝膠沉積表面的體積。在色譜柱中充滿凝膠的部分稱為凝膠床,因此柱體積又稱“床”體積,常用Vt表示。

⑵外水體積:色譜柱內(nèi)凝膠顆粒間隙,這部分體積稱外水體積,亦稱間隙體積,常用Vo表示。

⑶內(nèi)水體積:因?yàn)槟z為三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),顆粒內(nèi)部仍有空間,液體可進(jìn)入顆粒內(nèi)部,這就分間隙的總和為內(nèi)水體積,又稱定相體積,常用Vi表示。不包括固體支持物的體積(Vg)。

⑷峰洗脫體積:是指被分離物質(zhì)通過(guò)凝膠柱所需洗脫液有體積,常用Ve表示。當(dāng)使用樣品的體積很少時(shí),(與洗脫體積比較可以忽略不計(jì)),在洗脫圖中,從加樣到峰頂位置所用洗脫液體積為Ve。當(dāng)樣品體積與洗脫體積比較不能忽略時(shí),洗脫體積計(jì)算可以從樣品體積的一半到峰頂位置。當(dāng)樣品很大時(shí),洗脫體積計(jì)算可以從應(yīng)用樣品開(kāi)始到洗脫峰升高的彎曲點(diǎn)(或半高處)。

填料合成

凝膠色譜填料合成技術(shù)的進(jìn)展主要在下面四個(gè)方面:填料的微球化、窄粒度分布多孔硅微球的合成成功、小孔徑多孔硅微球合成成功以及新的硅微球表面化學(xué)改性的發(fā)展。近年來(lái)在這方面有較多的新產(chǎn)品,中國(guó)也有許多單位在研制和生產(chǎn)。高效凝膠色譜正在迅速改變凝膠色譜的應(yīng)用面。

高效色譜柱除了對(duì)填料的粒度有要求外,對(duì)粒度分布也要求相當(dāng)窄。用一般的制備方法往往得到粒度較寬的產(chǎn)品,需要進(jìn)一步過(guò)篩。當(dāng)填料的粒度在30微米以下時(shí),這種過(guò)篩非常困難,已經(jīng)成為填料制備上一個(gè)較大的技術(shù)難關(guān)。Kirkland,最近利用了尿素和甲醛在酸性介質(zhì)中形成大小均勻的液體高聚物,加入某種硅溶膠時(shí),硅溶膠的微珠將在液體高聚物中凝聚。最后把有機(jī)高聚物灼燒掉后就能得到由微粒硅珠堆積而成的多孔填料。這種堆積硅珠是球形的,粒度分布很窄,填料的孔徑?jīng)Q定于原始硅溶膠的規(guī)格,用不同的硅膠就可以制得不同孔徑的填料。柴志寬等則利用一種硅膠制成粒度分布窄的填料后,再利用適當(dāng)?shù)臄U(kuò)孔方法以得到各種孔徑的填料。從這些方法制得的微球填料,粒度分布可以達(dá)到相當(dāng)窄,所以可以不經(jīng)篩選直接使用。

隨著進(jìn)樣技術(shù)和色譜柱接頭設(shè)計(jì)的改進(jìn),已經(jīng)可以得到柱效每米在八萬(wàn)到十萬(wàn)的凝膠色譜填料。Wheals用四種GPC用的微球硅膠裝填色譜柱,都能達(dá)到每米八萬(wàn)到十萬(wàn)塊塔板數(shù)的高效。他用這種色譜柱有效地進(jìn)行了案件zhen查中所要求的分析問(wèn)題。

兩大分類

根據(jù)分離的對(duì)象是水溶性的化合物還是有機(jī)溶劑可溶物,又可分為凝膠過(guò)濾色譜(GFC)和凝膠滲透色譜(GPC)。

凝膠過(guò)濾色譜:凝膠過(guò)濾色譜一般用于分離水溶性的大分子,如多糖類化合物。凝膠的代表是葡萄糖系列,洗脫溶劑主要是水。

凝膠滲透色譜:凝膠滲透色譜法主要用于有機(jī)溶劑中可溶的高聚物(聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等)相對(duì)分子質(zhì)量分布分析及分離,常用的凝膠為交聯(lián)聚苯乙烯凝膠,洗脫溶劑為四氫呋喃等有機(jī)溶劑。

凝膠色譜不但可以用于分離測(cè)定高聚物的相對(duì)分子質(zhì)量和相對(duì)分子質(zhì)量分布,同時(shí)根據(jù)所用凝膠填料不同,可分離油溶性和水溶性物質(zhì),分離相對(duì)分子質(zhì)量的范圍從幾百萬(wàn)到100以下。

近年來(lái),凝膠色譜也廣泛用于分離小分子化合物。化學(xué)結(jié)構(gòu)不同但相對(duì)分子質(zhì)量相近的物質(zhì),不可能通過(guò)凝膠色譜法達(dá)到wan全的分離純化的目的。

GPC分離原理

凝膠具有化學(xué)惰性,它不具有吸附、分配和離子交換作用。讓被測(cè)量的高聚物溶液通過(guò)一根內(nèi)裝不同孔徑的色譜柱,柱中可供分子通行的路徑有粒子間的間隙(較大)和粒子內(nèi)的通孔(較小)。當(dāng)聚合物溶液流經(jīng)色譜柱(凝膠顆粒)時(shí),較大的分子(體積大于凝膠孔隙)被排除在粒子的小孔之外,只能從粒子間的間隙通過(guò),速率較快;而較小的分子可以進(jìn)入粒子中的小孔,通過(guò)的速率要慢得多;中等體積的分子可以滲入較大的孔隙中,但受到較小孔隙的排阻,介乎上述兩種情況之間。[1]經(jīng)過(guò)一定長(zhǎng)度的色譜柱,分子根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量被分開(kāi),相對(duì)分子質(zhì)量大的在前面(即淋洗時(shí)間短),相對(duì)分子質(zhì)量小的在后面(即淋洗時(shí)間長(zhǎng))。自試樣進(jìn)柱到被淋洗出來(lái),所接受到的淋出液總體積稱為該試樣的淋出體積。當(dāng)儀器和實(shí)驗(yàn)條件確定后,溶質(zhì)的淋出體積與其分子量有關(guān),分子量愈大,其淋出體積愈小。

(1)體積排除

(2)限性擴(kuò)散

(3)流動(dòng)分離

校正原理

用已知相對(duì)分子質(zhì)量的單分散標(biāo)準(zhǔn)聚合物預(yù)先做一條淋洗體積或淋洗時(shí)間和相對(duì)分子質(zhì)量對(duì)應(yīng)關(guān)系曲線,該線稱為“校正曲線”。聚合物中幾乎找不到單分散的標(biāo)準(zhǔn)樣,一般用窄分布的試樣代替。在相同的測(cè)試條件下,做一系列的GPC標(biāo)準(zhǔn)譜圖,對(duì)應(yīng)不同相對(duì)分子質(zhì)量樣品的保留時(shí)間,以lgM對(duì)t作圖,所得曲線即為“校正曲線”。通過(guò)校正曲線,就能從GPC譜圖上計(jì)算各種所需相對(duì)分子質(zhì)量與相對(duì)分子質(zhì)量分布的信息。聚合物中能夠制得標(biāo)準(zhǔn)樣的聚合物種類并不多,沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)樣的聚合物就不可能有校正曲線,使用GPC方法也不可能得到聚合物的相對(duì)分子質(zhì)量和相對(duì)分子質(zhì)量分布。對(duì)于這種可以使用普適校正原理。

普適校正原理

由于GPC對(duì)聚合物的分離是基于分子流體力學(xué)體積,即對(duì)于相同的分子流體力學(xué)體積,在同一個(gè)保留時(shí)間流出,即流體力學(xué)體積相同。

兩邊取對(duì)數(shù):即如果已知標(biāo)準(zhǔn)樣和被測(cè)高聚物的k、α值,就可以由已知相對(duì)分子質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)樣品M1標(biāo)定待測(cè)樣品的相對(duì)分子質(zhì)量M2。

凝膠種類

聚丙烯酰胺凝膠

凝膠色譜法:是一種人工合成凝膠,是以丙烯酰胺為單位,由甲叉雙丙烯酰胺交聯(lián)成的,經(jīng)干燥粉碎或加工成形制成粒狀,控制交聯(lián)劑的用量可制成各種型號(hào)的凝膠。交聯(lián)劑越多,孔隙越小。聚丙烯酰胺凝膠的商品為生物膠-P(Bio-Gel P),由日本Tosoh的TSKGEL的pw系列,適合蛋白和多糖的純化。

Tosoh的TSKGEL的pw系列

交聯(lián)葡聚糖凝膠:⑴Sephadex G交聯(lián)葡聚糖的商品名為Sephadex,不同規(guī)格型號(hào)的葡聚糖用英文字母G表示,G后面的阿拉伯?dāng)?shù)為凝膠得水值的10倍。例如,G-25為每克凝膠膨脹時(shí)吸水2.5克,同樣G-200克每克干膠吸水20克。交聯(lián)葡聚糖凝膠的種類有G-10,G-15,G-25,G-50,G-75,G-100,G-150,和G-200。因此,“G”反映,凝膠的交聯(lián)程度,膨脹程度及分部范圍。⑵Sephadex LH-20,是─Sephadex G-25的羧丙基衍生物,能溶于水及親脂溶劑,用于分離不溶于水的物質(zhì)。

瓊脂糖凝膠:商品名很多,常見(jiàn)的有,Sepharose(瑞典,pharmacia),Bio-Gel-A(美國(guó)Bio-Rad)等。瓊脂糖凝膠是依靠糖鏈之間的次級(jí)鏈如氫鍵來(lái)維持網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的疏密依靠瓊脂糖的濃度。一般情況下,它的結(jié)構(gòu)是穩(wěn)定的,可以在許多條件下使用(如水,pH4-9范圍內(nèi)的鹽溶液)。瓊脂糖凝膠在40℃以上開(kāi)始融化,也不能高壓消毒,可用化學(xué)滅菌活處理。

實(shí)驗(yàn)技術(shù)

層析柱

層析柱是凝膠層析技術(shù)中的主體,一般用玻璃管或有機(jī)玻璃管。層析柱的直徑大小不影響分離度,樣品用量大,可加大柱的直徑,一般制備用凝膠柱,直徑大于2厘米,但在加樣時(shí)應(yīng)將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。此外,直徑加大,洗脫液體體積增大,樣品稀釋度大。分離度取決于柱高,為分離不同組分,凝膠柱床必須有適宜的高度,分離度與柱高的平方根相關(guān),但由于軟凝膠柱過(guò)高擠壓變形阻塞,一般不超過(guò)1米。分族分離時(shí)用短柱,一般凝膠柱長(zhǎng)20-30厘米,柱高與直徑的比較5:1─10:1,凝膠床體積為樣品溶液體積的4-10倍。分級(jí)分離時(shí)柱高與直徑之線為20:1─100:1,常用凝膠柱有50×25厘米,10×25厘米。層析柱濾板下的死體積應(yīng)盡可能的小,如果支掌濾板下的死體積大,被分離組分之間重新混合的可能性就大,其結(jié)果是影響洗脫峰形,出現(xiàn)拖尾出象,降低分辨力。在精確分離時(shí),死體積不能超過(guò)總床體積的1/1000。

根據(jù)所需凝膠體積,估計(jì)所需干膠的量。一般葡聚糖凝膠吸水后的凝膠體積約為其吸水量的2倍,例如Sephadex G-20的吸水量為20,1克Sephadex G─200吸水后形成的凝膠體積約40ml。凝膠的粒度也可影響層析分離效果。粒度細(xì)胞分離效果好,但阻力大,流速慢。一般實(shí)驗(yàn)室分離蛋白質(zhì)采用100-200號(hào)篩目的的Sephadex G-200效果好,脫鹽用Sephadex G-25、G-50,用粗粒,短柱,流速快。

凝膠的制備

商品凝膠是干燥的顆粒使用前需直接在欲使用的洗脫液中膨脹。為了加速膨脹,可用加熱法,即在沸水浴中將濕凝膠逐漸升溫至近沸,這樣可大大中速膨脹,通常在1-2小時(shí)內(nèi)即可完成。特別是在使用軟膠時(shí),自然膨脹需24小時(shí)至數(shù)天,而用加熱法在幾小時(shí)內(nèi)就可完成。這種方法不但節(jié)約時(shí)間,而且還可消毒,除去凝膠中污染的細(xì)菌和排除膠內(nèi)的空氣。

樣品溶液處理

樣品溶液如有沉淀應(yīng)過(guò)濾或離心除去,如含脂類可高速離心或通過(guò)Sephadex G-15短柱除去。樣品的粘度不可大,含蛋白為超過(guò)4%,粘度高影響分離效果。上柱樣品液的體積根據(jù)凝膠床體積的分離要求確定。分離蛋白質(zhì)樣品的體積為凝膠床的1-4%(一般約0.5-2ml),進(jìn)行分族分離時(shí)樣品液可為凝膠床的10%,在蛋白質(zhì)溶液除鹽時(shí),樣品可達(dá)凝膠床的20-30%。分級(jí)分離樣品體積要小,使樣品層盡可能窄,洗脫出的峰形較好。

防止微生物污染

交聯(lián)葡聚糖和瓊脂糖都是多糖類物質(zhì),防止微生物的生長(zhǎng),在凝膠層析中十分重要,常用的抑菌劑有:

⑴疊氨鈉(NaN3)

在凝膠層析中只要用0.02%疊氮鈉已足夠防止微生物的生長(zhǎng),疊氮鈉易溶一水,在20℃時(shí)約為40%;它不與蛋白質(zhì)或碳水化合物相互作用,因此疊氮鈉不影響抗體活力;不會(huì)改變蛋白質(zhì)和碳水化合物的層析我特性。疊氮鈉可干擾熒光標(biāo)記蛋白質(zhì)。

⑵可樂(lè)酮[Cl3C-C(OH)(CH3)2]

在凝膠層析中使用濃度為0.01-0.02%。在微酸性溶液中它的殺菌效果最jia,在強(qiáng)堿性溶液中或溫度高于60℃時(shí)易引起分解而失效。

⑶乙基汞代巰基水楊suan鈉

在凝膠層析中作為抑菌劑使用濃度為0.05-0.01%。在微酸性溶液中最為有效。重金屬離子可使乙基代巰基的物質(zhì)結(jié)合,因而包含疏基的蛋白質(zhì)可在不同程度上降低它的抑菌效果。

⑷苯基汞代鹽

在凝膠層析中使用濃度為0.001-0.01%。在微堿性溶液中抑效果最jia,長(zhǎng)時(shí)間放置時(shí)可與鹵素、硝酸根離子作用而產(chǎn)生沉淀;還原劑可引起此化合物分解;含疏基的物質(zhì)亦可降低或抑制它的抑菌作用。

實(shí)驗(yàn)部分

直接法:在測(cè)定淋出液濃度的同時(shí)測(cè)定其粘度或光散射,從而求出其分子量。

間接法:用一組分子量不等的、單分散的試樣為標(biāo)準(zhǔn)樣品,分別測(cè)定它們的淋出體積和分子量,則可確定二者之間的關(guān)系。


應(yīng)用

凝膠色譜不但可以用于分離測(cè)定高聚物的相對(duì)分子質(zhì)量和相對(duì)分子質(zhì)量分布,同時(shí)根據(jù)所用凝膠填料不同,可分離脂溶性和水溶性物質(zhì),分離相對(duì)分子質(zhì)量的范圍從幾百萬(wàn)到100以下。近年來(lái),凝膠色譜也廣泛用于小分子化合物。相對(duì)分子質(zhì)量相近而化學(xué)結(jié)構(gòu)不同的物質(zhì),不可能通過(guò)凝膠滲透色譜法達(dá)到wan全分離純化的目的。凝膠色譜不能分辨分子大小相近的化合物,相對(duì)分子質(zhì)量相差需在10%以上才能得到分離。

研究動(dòng)向

凝膠色譜的大量研究工作仍是多方面的,其中儀器、填料、聯(lián)用技術(shù)、色譜理論等方面的進(jìn)展是和整個(gè)液體色譜的進(jìn)展相關(guān)的。但是下面四個(gè)研究動(dòng)向意義較大,值得注意。通過(guò)與其他儀器聯(lián)用,解決凝膠色譜法測(cè)定高聚物分子量分布從相對(duì)法向絕對(duì)法過(guò)渡。測(cè)定高聚物分子量分布是凝膠色譜最重要的應(yīng)用。試樣先根據(jù)分子體積(即分子量)分離后再檢測(cè)各組分的分子量及含量。在凝膠色譜中試樣的分離是在色譜柱中進(jìn)行的,被分離后的組分在流出柱子時(shí)就同時(shí)連續(xù)地用濃度檢測(cè)器和分子量檢測(cè)器分別檢測(cè)各組分的濃度和分子量,把兩個(gè)檢測(cè)器的輸出訊號(hào)用記錄儀記錄后即得反映分子量分布的凝膠色譜曲線。過(guò)去由于沒(méi)有比較靈敏和瞬時(shí)響應(yīng)的分子量檢測(cè)器,因而利用一組不同分子量的標(biāo)樣來(lái)標(biāo)定色譜柱,然后從分子量淋出體積的標(biāo)定曲線來(lái)作數(shù)據(jù)換算。這種用相對(duì)方法來(lái)檢測(cè)分子量雖然暫時(shí)解決了問(wèn)題,但是隨之而來(lái)的是實(shí)驗(yàn)工作量增加以及數(shù)據(jù)處理方法上存在困難。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性在很大程度上決定于標(biāo)定曲線、標(biāo)樣分子量數(shù)值以及數(shù)據(jù)處理方法的可靠性。其中色譜柱分離效率不理想所引起的色譜峰加寬效應(yīng)的改正,不但實(shí)驗(yàn)方法比較煩瑣,而且數(shù)據(jù)處理也比較復(fù)雜,需要用電子計(jì)算機(jī)來(lái)計(jì)算。所以雖然文獻(xiàn)中已經(jīng)推薦許多據(jù)說(shuō)是比較滿意的計(jì)算方法,但這總不是一個(gè)根本解決的方法。只有真正找到絕對(duì)分子量檢測(cè)器,問(wèn)題才算較好解決。原有的許多分子量測(cè)定方法,由于不能做到足夠靈敏的瞬時(shí)響應(yīng)而未能成功地在凝膠色譜上應(yīng)用。最近Ouano用激光小角光散射儀(LALLS)來(lái)作分子量檢測(cè)器得到比較好的結(jié)果。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不需要標(biāo)定曲線,也不必進(jìn)行峰加寬改正。

由于激光的準(zhǔn)直性較好,強(qiáng)度較大,可以允許在較小的角度下測(cè)量較稀溶液的散射光強(qiáng),由此可以直接計(jì)算出重均分子量的近似值而不需要象經(jīng)典光散射那樣實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)還要對(duì)濃度和散射角度向零作雙外推。實(shí)驗(yàn)上,凝膠色譜儀和激光小角光散射儀聯(lián)用后,還可與計(jì)算機(jī)直接聯(lián)接進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。在一次實(shí)驗(yàn)進(jìn)行完畢后,所需要的數(shù)據(jù)可全部立即取得。GPC-LALLS似乎得到更合理的數(shù)值。激光小角散射儀已開(kāi)始商品化,預(yù)計(jì)不久將會(huì)有更多的研究工作,來(lái)說(shuō)明已經(jīng)在何種程度上解決了凝膠色譜的相對(duì)測(cè)定過(guò)渡到絕對(duì)測(cè)定。

凝膠色譜中的濃度檢測(cè)器和通常的液體色譜一樣仍然是一個(gè)薄弱環(huán)節(jié),繼續(xù)在尋找更理想的檢測(cè)器。最chang用的仍然是示差折光檢測(cè)器和紫外檢測(cè)器。

關(guān)鍵詞:記錄儀 色譜儀
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