2025年03月19日 09:09上海酶聯生物科技有限公司點擊量：67
酶標記抗體或抗原來檢測抗原或抗體的方法，其應用范圍極廣，顯示方法是用酶的特殊底物來處理反應后的標本，通過酶催化底物的顯色反應來測定抗原或抗體的存在，以酶標作定量或定性分析。
近年來，技術取得了顯著的發展，主要表現在以下方面：
繼單克隆抗體后的第三代抗體基因工程抗體的應用，明顯地提高了檢測的特異性，基本消除了抗原、保證了分析的準確性。抗體制備技術的進步，使試劑的生產制備得以規模化，檢測范圍日益擴展，小分子抗原、半抗原的檢測成為事實。
分析方式的改進與多樣化提高了試驗的敏感性。
（1）由于酶標記技術的進步，標記酶的應用已從過氧化物酶，擴展到堿性磷酸酶，β半乳糖苷酶，尿素酶，葡萄糖6磷酸脫氫酶，葡萄糖氧化酶，蘋果酸脫氫酶，至今有二十多種酶被應用于EIA ，但應用比較多的仍然是辣根過氧化物酶（Horseradish Peroxidase,HRP）和堿性磷酸酶（Alkalinephasphotase，ALP）。
（2）除早期的競爭法，間接法外，又發展了雙抗原夾心法測抗體，偶聯酶標記法測抗原，橋聯酶免疫分析，酶放大免疫分析技術等，后者應用了和素系統，底物循環放大系統，酶-抗酶放大系統及酶偶聯放大系統等。
（3）酶免疫分析與其它標記免疫分析相結合如與熒光免疫分析（Fluorescence Immunoassay ,FIA）結合形成熒光酶免疫分析（Fluorescence Enzyme Immunoassay ，FEIA），酶促放大時間分辨熒光免疫分析（Enzyme-am-plified time-resolved fluoroimmunoassay ，EATRFIA），EIA與化學發光免疫分析（Chemiluminescence immunoassay，CLIA）結合形成酶—化學發光免疫分析，增強化學發光酶免疫分析（ECLEIA）。EIA與聚合酶鏈反應結合形成的PCR-EIA分析等。
（4）改進固相載體的技術
傳統ELISA應用的固相載體是聚苯乙稀微孔板，聚苯乙烯珠或條，后發展為硝酸纖維素膜、活化濾紙、硅片、尼龍、利用高分子材料合成的各種固相微粒等。為提高固相表面的結合容量，增加結合物的范圍而改造聚苯乙烯的表面，如用化學偶聯法導入功能性醛基、酰基、烷胺基等以更好地與蛋白質，多肽的羧基結合，用位點導向性共價偶聯法引入親和素，蛋白A，多聚賴氨酸等，以牢固地捕獲蛋白或多肽，超平整聚苯乙烯表面的制備，克服了表面粗糙帶來的不均一性，達到平均粗糙度只有2A+的超平整平面，實現了對蛋白的結合容量大，脫附率低，孔間均一性好，使試驗精密度達5%。
應用于雙抗體夾心法時，聚苯乙烯經射線照射后，可以增加其吸附性能特別是對免疫球蛋白的吸附性能。近年美國Corning公司研制成功表面經琥珀酰亞胺酯活化酶標板，其質量達到氨基活化相似水平。
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