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當(dāng)前位置:上海士鋒生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>士鋒生物植物組織中纖維素含量的測定
纖維素是植物細(xì)胞壁的主要成分之一,纖維素含量的多少,關(guān)系到植物細(xì)胞機(jī)械組織發(fā)達(dá)與否。因而影響作物的抗倒伏,抗病蟲害能力的強(qiáng)弱。測定糧食、蔬菜及纖維作物產(chǎn)品中纖維素含量是鑒定其品質(zhì)好壞的重要指標(biāo)。
一、原理
纖維素(Cellulose)為β-葡萄糖殘基組成的多糖,在酸性條件下加熱能分解成β-葡萄糖。β-葡萄糖在強(qiáng)酸作用下,可脫水生成β-糠醛類化合物。β-糠醛類化合物與蒽酮脫水縮合,生成黃色的糠醛衍生物。顏色的深淺可間接定量測定纖維素含量。
二.材料、儀器設(shè)備及試劑
(一)材料:烘干的米、面粉或風(fēng)干的棉、麻纖維。
(二)儀器設(shè)備:1. 小試管;2. 量筒;3. 燒杯;4. 移液管;5. 容量瓶;6. 布氏漏斗;7. 分析天平;8. 水浴鍋;9. 電爐;10. 分光光度計。
(三)試劑:1. 60%H2SO4溶液;2. 濃H2SO4(AR);3. 2%蒽酮試劑:將2g蒽酮溶解于100ml乙酸乙酯中,貯放于棕色試劑瓶中;4. 纖維素標(biāo)準(zhǔn)液:準(zhǔn)確稱取100mg純纖維素,放入100ml量瓶中,將量瓶放入冰浴中,然后加冷的60%H2SO460~70ml,在冷的條件下消化處理20~30min;然后用60%H2SO4稀釋至刻度,搖勻。吸取此液5.0ml放入另一50ml量瓶中,將量瓶放入冰浴中,加蒸餾水稀釋至刻度,則每ml含100μg纖維素。
三.實(shí)驗步驟
(一)求測纖維素標(biāo)準(zhǔn)回歸方程
1. 6支小試管,分別放入0,0.40,0.80,1.20,1.60,2.00ml纖維素標(biāo)準(zhǔn)液,然后分別加入2.00,1.60,1.20,0.80,0.40,0ml蒸餾水,搖勻,則每管依次含纖維素0,40,80,120,160,200μg。
2. 向每管加0.5ml2%蒽酮,再沿管壁加5.0ml濃H2SO4,塞上塞子、搖勻,靜置1min。然后在620nm下,求測不同含量纖維素溶液的吸光度。
3. 以測得的吸光度為Y值,對應(yīng)的纖維素含量為X值,求得Y隨X而變的回歸方程。
(二)樣品纖維素含量的測定
1. 稱取風(fēng)干的棉花纖維0.2g于燒杯中,將燒杯置冷水浴中,加入60%H2SO460ml,并消化30min,然后將消化好的纖維素溶液轉(zhuǎn)入100ml容量瓶,并用60%H2SO4定容至刻度,搖勻后用布氏漏斗過濾于另一燒杯中。
2. 取上述濾液5ml放入100ml容量瓶中,在冷水浴上加蒸餾水稀釋至刻度,搖勻后用。
3. 取2中的溶液2ml于具塞試管中,加入0.5ml 2%蒽酮試劑,并沿管壁加5ml濃H2SO4,塞上塞子,搖勻,靜置12min,然后在620nm波長下,求測吸光度。
四、結(jié)果與分析
根據(jù)測得的吸光度按回歸方程求出纖維素的量,然后按下式計算樣品纖維素的含量:
Y(%)=X×10-6×a×100 /W
式中:X-按回歸方程計算出纖維素含量(μg)。W-樣品重(g)。10-6-將μg換算成g的系數(shù)。A-樣品稀釋倍數(shù)。Y-樣品中纖維素含量(%)。
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