當前位置:上海遠慕生物科技有限公司>>技術文章>>引物定量不準的可能情況你知道嗎
引物定量不準,出現這種情況的可能性有:
(1)定量錯誤、分裝錯誤、引物抽干或收樣過程中意外丟失。這種可能性有,但是很少,因為作為專業的引物合成公司,生產人員都是經過嚴格的專業培訓,這種錯誤是要求謹慎避免甚至杜絕的。一般情況下,引物都有留樣備份,接到用戶投訴后,都會找出留樣重新定量,一般都沒有問題,如確實存在問題,則可安排重新準備一份。
(2)系統誤差,我們認為10%左右為允許誤差。使用過程中,引物工作濃度范圍很寬,定量上的少許偏差不影響實驗。
(3)用戶收到引物干粉時,打開引物管蓋前沒有離心或其他誤操作導致引物干粉部分丟失。
(4)用戶沒有能夠正確理解引物OD數的含義,沒有能夠正確使用分光光度計,特別是使用微量測定;用戶沒有將OD讀數,正確地轉換成母液中OD數。這種情況比較常見。
例如,驗證標2OD引物量是否準確,簡單的做法是:加入1ml水,徹di溶解混勻后,取100ul,加入900ul水,用光徑為1cm的石英比色杯,波長260nm,此時光吸收的讀數為0.2。
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