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昆蟲細胞是主要提取來自昆蟲的一類真核細胞。通過培養制造宿主的病毒,可以引起昆蟲流行病,但對人畜和植物無害,因而可作病毒殺蟲劑,還可以生產某些藥用蛋白。細胞培養瓶是培養昆蟲細胞常用的一種細胞培養耗材,那么在培養昆蟲細胞時需要注意哪些問題呢?
1、溫度與環境:昆蟲細胞一般應該在27℃、非濕化的環境中培養,建議不要進行二氧化碳交換,所以細胞培養瓶盡量選擇密閉的蓋子。
2、培養基:不同細胞對培養基的需求也有所差異,應該根據細胞生長特性,選擇昆蟲細胞專用的培養基。
3、貼壁昆蟲細胞:細胞密度低于匯合狀態的20% 時,細胞生長會受到抑制。健康狀態的細胞是對數期收獲的細胞,所以在傳代時應選擇對數期進行。但是,如果培養的是強貼壁性昆蟲細胞,則應在細胞達到匯合狀態或者剛剛開始從培養瓶底部脫離時進行傳代,因為此時細胞容易脫離。
4、貼壁昆蟲細胞在無血清培養條件下,昆蟲細胞與基質貼附非常牢固,需要花費較大力氣才能使其脫落。要使細胞脫落,可以采用拍掌的動作快速振搖一下細胞培養瓶。為了避免污染,進行此操作前必須蓋緊蓋子。
5、懸浮培養:一些昆蟲細胞系可能需要一定的過程來適應懸浮培養。進行細胞懸浮培養時無需更換培養基,定期傳代時需要吸出細胞懸液,然后加入適量培養基,將細胞稀釋到適當的密度。添加新鮮培養基后可使細胞營養素達到wan全補充。
以上是細胞培養瓶培養昆蟲細胞需要注意的五個方面,此外還要注意盡量不要劇烈搖晃細胞培養瓶,避免對細胞造成損傷。
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