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豬端粒酶(TE)ELISA檢測試劑盒說明書

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產品名稱:豬端粒酶(TE)elisa試劑盒
英文名稱:Procine TE ELISA Kit
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
產品性狀:48T/96T,盒裝液體
保存條件:2-8℃低溫保存
保質期:六個月


樣本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
實驗儀器:酶標儀、恒溫箱、移液器、燒杯、自動洗板機、離心機。
檢測方法:酶聯免疫吸附法
儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
研究領域:炎癥研究、神經生物學、新陳代謝、信號通路、免疫學、傳染病、其他研究。
實驗前:試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用。
特別說明:本Elisa試劑盒僅供科研實驗,不得用于其他用途;使用前仔細閱讀ELISA試劑盒說明書。

樣品的處理(是否溶血)、孵育時間和溫度、加入終止液后的反應條件、洗板條件、加樣手法、抗體的純度、抗體濃度搭配等等,總之和Western Blot不同,ELISA作為定量方法有時候確實是太過敏感,而且本身方法也算有些復雜,各中實驗條件的略微改變都可能影響zui終的實驗結果。所以操作過程中,必須得嚴格按照產品說明書進行,以免浪費時間和經費,造成不必要的損失。


實驗注明
1.  試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2.   加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,*個孔與zui后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的 “預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)控制在10分鐘內,如標本數量多,推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育:為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發;洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響zui后的酶標儀讀數。
5.  試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請精確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請提前加入終止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
7.  底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。
    如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數。


計算
  以標準物的濃度為縱坐標(對數坐標),OD值為橫坐標(對數坐標),在對數坐標紙上繪出標準曲線。推薦使用專業制作曲線軟件進行分析,如curve expert 1.3,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度,再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。

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