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131次上海遠慕生物科技詳細為您介紹人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA試劑盒檢測說明書,用途,規格,保質期,價格,品牌等詳情,本司提供ELISA試劑盒免費代測服務,一周內出結果。
【信息說明】
中文名:人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA試劑盒
中文別稱:人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA Kit
英文名稱:Human tubular basement membrane antibogy,TBM ELISA kit
供應商:上海遠慕
規格96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
樣品形式:血清 / 血漿 / 細胞培養上清 / 其它生物液體。
預期應用:ELISA法定量測定血清、血漿、細胞培養上清或其它相關生物液體中的含量。
【保存方法】
1、血清
操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿
EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液
1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、組織勻漿
將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5、保存
如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。
注意:如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
【操作步驟】
1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復溫平衡30分鐘。
2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
3、加標準品和待測樣本:取足夠數量的酶標包被板,固定于框架上,分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。
4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。
6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,空白對照孔不加。
7、溫育:重復4的操作。
8、洗板:重復5的操作。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,37℃避光顯色15min。
10、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,終止反應(顏色由藍色立轉黃色)。
11、測定:以空白孔調零,在終止后15分鐘內,用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。
12、計算:根據標準品的濃度及對應的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應的樣品濃度,也可以使用各種應用軟件來計算。終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數。
【注意事項】
1、試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2、濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3、各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4、請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6、底物請避光保存。
7、嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9、本試劑不同批號組分不得混用。
10、如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
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