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甲苯胺藍染色液(0.5%,硼酸鹽法)使用說明書

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甲苯胺藍染色液(0.5%,硼酸鹽法) 用于細胞核染色、肥大細胞染色,規格為100ml,屬細胞染色液類,有效期12個月.

 

信息說明

 

產品名稱:甲苯胺藍染色液(0.5%,硼酸鹽法)

供應商:遠慕染色液廠家

規格:100ml

分類:細胞染色

儲存條件:室溫,避光,12個月

用途:細胞核染色、肥大細胞染色

注意事項:硼酸鹽溶液配制,甲苯胺藍中的陽離子與組織細胞的酸性物質結合而被染色。染色結果為:細胞核呈藍色,而肥大細胞胞質內含有肝素等異色性物質呈異染性紫紅色。


 

染色原理

 

1、甲苯胺藍染色液(0.5%,硼酸鹽法)由于硼酸鹽緩沖液呈強堿性,更利于組織細胞的著色;甲苯胺藍(Toluidine Blue O)是一種常用的人工合成染料, 屬于醌亞胺染料類, 這類染料主要含有胺基和醌型苯環兩個發色團,從而成色原顯色。

 

2、甲苯胺藍中的陽離子有染色作用, 組織細胞的酸性物質與其中的陽離子相結合而被染色。

 

3、甲苯胺藍還含有兩個助色團,能促使染料產生電離成鹽類;幫助發色團對組織產生染色力,使切片上的組織細胞著色,可染細胞核使之呈藍色。

 

4、肥大細胞胞質內含有肝素和組織胺等異色性物質,遇到甲苯胺藍可呈異染性紫紅色,臨床上經常用于肥大細胞染色。


 

注意事項

 

1、針對于胃粘膜組織、軟骨組織等較難著色組織的染色,浸染于甲苯胺藍染色液的時間應相應延長。

 

2、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

3、請嚴格按照甲苯胺藍染色液(0.5%,硼酸鹽法)說明書上的要求進行規范化操作。

 

4、如果本品沒有使用完,請遵循染色液相關保存方法進行完善保存。

 

操作步驟

 

甲苯胺藍染色液(0.5%,硼酸鹽法)屬細胞染色液類產品,其他操作步驟主要有以下四點進行:

 

A、肥大細胞染色

 

1、脫蠟至蒸餾水。

 

2、根據切片厚度和組織的不同,浸染于甲苯胺藍染色液。

 

3、蒸餾水或去離子水輕輕沖洗。

 

4、冰乙酸分化,直到細胞核和顆粒清晰可見。

 

5、快速和無水乙醇脫水。

 

6 二甲苯透明,封固。

 

染色結果:肥大細胞呈紫紅色;背景呈淡藍色。

 

B、軟骨染色

 

1 石蠟切片入二甲苯。

 

2 系列乙醇各。

 

3 自來水洗。

 

4 Toluidine Blue O Stain,浸染。

 

5 自來水洗,濾紙吸干水分。

 

6 丙酮分化至軟骨細胞呈紫藍色清楚可見。

 

7 逐級乙醇脫水。

 

8 二甲苯透明,中性樹膠封固。

 

染色結果:軟骨、成骨細胞呈紫紅色;背景呈淡藍色。

 

 

C、細胞涂片染色

 

1、用乙醇溶液稀釋甲苯胺藍染色液, 一般要求稀釋即可。

 

2、細胞涂片后,立即放入乙醇中固定,取出放在紙巾上。

 

3、滴加稀釋后的甲苯胺藍染色液進行滴染,加蓋玻片讓染料滲透到細胞中。

 

4、將玻片豎起,稍加壓力,使多余染料被紙巾吸去。

 

5、無需干燥,直接鏡檢。

 

染色結果:細胞核、淋巴細胞呈深藍色;核仁呈紫紅色;紅細胞呈橘紅;細胞質、單核細胞呈淡藍色。

 

 

D、原位雜交染色

 

1 用蒸餾水或去離子水稀釋到相應的濃度,憑經驗一般稀釋比例大于1:100

 

2 玻片在稀釋好的染色液中短暫浸泡。

 

3 在蒸餾水或去離子水浸泡數次。

 

4 按需求進行壓片固定。

 

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