上海遠慕為您提供人p物質(zhì)（SP）ELISA分析檢測試劑盒，我司是家專業(yè)供應(yīng)進口/國產(chǎn)ELISA試劑盒的優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商，專業(yè)出售酶聯(lián)免疫試劑盒，白介素試劑盒，金標(biāo)檢測試劑盒，染色試劑盒，生化試劑盒以及培養(yǎng)基，抗體，動物血清，標(biāo)準(zhǔn)品，化學(xué)試劑，實驗耗材，細胞株，其他實驗試劑及實驗品，ELISA種屬涵蓋了科研實驗所需的動植物，咨詢！

    中文名：人p物質(zhì)（SP）ELISA試劑盒

    別名：人p物質(zhì)（SP）ELISA Kit

    供貨商：上海遠慕

    產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T

    檢測限：7.81-500 pg/mL

    經(jīng)營種類：進口分裝和原裝、國產(chǎn)。

    預(yù)期應(yīng)用：定性或者定量檢測人血清、血漿、尿液、組織液中的人P物質(zhì)（SP）

    檢測種屬：人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、豬、雞、鴨elisa試劑盒等種屬

    適用范圍：僅供科研使用，不得用于臨床

    標(biāo)本收集 注意事項：

    1）在收集標(biāo)本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。

    2）我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測，對收集后及時進行檢測。標(biāo)本類型：標(biāo)本必須為液體，不含沉淀，包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標(biāo)本量收集體積＝100ul×檢測種類。1-3天左右檢測的樣本可儲存在4℃?zhèn)溆谩Ｈ缬刑厥庠蛐枰芷谛允占瘶?biāo)本，請將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或- 70℃條件下保存，避免反復(fù)凍融。

    操作步驟：

    1、加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

    2、溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。

    3、配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

    4、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此

    重復(fù)5次，拍干。

    5、加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

    6、顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色

    10 分鐘。

    7、終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

    8、測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

    Elisa試劑盒對標(biāo)本的要求：

    1、血清：：溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

    2、血漿：根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

    3、尿液：無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

    4、 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。

    5、組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

    人p物質(zhì)（SP）ELISA試劑盒操作常見問題解析：

    1.加樣

    在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中，必然有使用微量加樣器加入樣本的步驟。注意的關(guān)鍵點是：加樣不可太快，要避免加在孔壁上部，不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快，無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū)，易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。所以，有時候一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測定為陽性，下次測定為陰性，往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致。

    2.邊緣效應(yīng)

    使用96孔板的ELISA測定中，常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應(yīng)"，即外周孔顯色較中心孔深。經(jīng)研究證實在溫育中的熱力學(xué)梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體，在實驗室的常規(guī)ELISA測定中，將板從室溫（通常在25℃左右）置于37℃溫箱，板也升溫時，在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學(xué)梯度。因此使用水浴或在將反應(yīng)溶液加入至板孔中時，將板和溶液均加熱至溫育溫度（如37℃），就可以很容易地排除“邊緣效應(yīng)"，并且可提高測定的重復(fù)性。

     人p物質(zhì)（SP）ELISA試劑盒包含以下各組分：

    （1）結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液；

    （2）洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；

    （3）酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）；

    （4）酶的底物；

    （5）陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），ELISA試劑盒參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清（定量測定中）；

    （6）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；

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