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MTT檢測細胞活性的操作方法
一、MTT 是什么
MTT 是一種粉末狀化學試劑，全稱為 3-(4,5)-dimethylthiahiazo
(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide，漢語化學名為 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基
四氮唑溴鹽，商品名：噻唑藍。是一種黃顏色的染料。
二、MTT 法用來做什么
簡單地說：是一種檢測細胞存活和生長的方法。
MTT 主要有兩個用途
1．藥物（也包括其他處理方式如放射線照射）對體外培養的細胞毒性的測定；
2．細胞增殖及細胞活性測定。
MTT檢測細胞活性的操作方法 三、為何 MTT 可以用來做上述工作
檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性 MTT 還原為水不溶性的藍紫色
結晶甲瓚（Formazan）并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶
解細胞中的甲瓚，用酶標儀在 490nm 波長處測定其光吸收值，在一定細胞數范圍內，MTT
結晶形成的量與細胞數成正比。根據測得的吸光度值（OD 值），來判斷活細胞數量，OD
值越大，細胞活性越強（如果是測藥物毒性，則表示藥物毒性越?。?。
四、實驗所需材料
1．MTT 溶液的配制通常 MTT 配成的終濃度為 5mg/ml,須用 PBS 或生理鹽水做溶劑。
市面上一般 MTT 的包裝為 100mg,250mg 或 1g
1.1 對于 100mg 這樣的小包裝，廠家都是將 MTT 放入小管中的，個人建議不要再用天平稱
量分裝，而應該一次性將其全配制成溶液，如 100mg 用 20mlPBS 來溶解。具體做法：預
先在 50ml 離心管（沒有的話，可用培養瓶替代）加入 20ml PBS，從中先吸取 500-1000ul
PBS 裝入含 MTT 的小管中，吹打若干次后將其移入 50ml 離心管，然后再混勻。可以重復
幾次，以使小管中的 MTT 不殘留于管內。將 MTT *混勻后，用 0.22μm 濾膜過濾以除去
溶液里的細菌，分裝避光(避光袋或是黑紙、錫箔紙包住)可長期保存于-20 度。按細胞培養
板每孔需加 10ul 計算，一般每 96 孔板約需 1ml，所以分裝時可考慮每管分裝 1ml。
1.2 對于大包裝，可按上述方法稱取一部分溶解，也有人將粉劑分裝在 EP 管里，用的時候
現配，直接往培養板中加。
注意事項：
1. 在配制和保存的過程中，容器用鋁箔紙包住。
配成的 MTT 需要無菌，MTT 對菌很敏感
MTT 一般現用現配，過濾后 4 度避光保存兩周內（個人曾做過 4 度避光保存 4 周的
MTT 溶液，效果仍然不錯）有效，或配制成 5mg/ml 保存在-20 度長期保存，避免反復凍融，
小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解。當 MTT 變為灰綠色時就
不能再用。
MTT 有致癌性，用的時候小心,有條件帶那種透明的簿膜手套.
2．MTT 甲瓚溶解液
2.1 二甲基亞砜 DMSO，可以直接溶解，無需配制，使用方便，溶解速度快，但對人體毒性
較大，且需去除原培養液，在去除培養液的過程中，可能會把結晶去掉，導致結果不穩定。
2.2 三聯溶解液：SDS10g，異丁醇 5ml，10M HCl 0.1ml 用雙蒸水溶解配成 100ml 溶液，
該溶解液不需去除原培養基，但溶解較慢。
該溶解液因含有 SDS，在低溫保存的時候易產生結晶，因此在用之前必須提前幾小時拿至
室溫，將 SDS 結晶全部溶解后再使用。
人肺腺癌細胞 Calu-3細胞
人胚肺轉化細胞 SL-1細胞
人支氣管上皮樣細胞 BEAS-2B細胞
人胚肺二倍體細胞 HEL-2細胞
人肺鱗癌細胞 NCI-H226細胞
人肺轉化細胞系 AE1201細胞
人胚肺細胞系 KuMA細胞
人胚肺二倍體細胞 HEL-1細胞
人小細胞肺癌細胞 DMS 153細胞
人肺細胞 HLF-a細胞
人胚肺二倍體細胞 KMB-17細胞
人胚肺二倍體細胞 2BS細胞
人胚胎肺成纖維細胞 WI-38細胞
人胚胎氣管組織來源細胞 CCC-HBE-2細胞
人胚肺成纖維細胞 CCC-HPF-1細胞
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人胚肺成纖維細胞 MRC-5細胞 細胞株
人小細胞肺癌細胞 NCI-H209細胞
人低分化肺腺癌細胞 GLC-82細胞
人小細胞肺癌細胞 NCI-H446細胞
人非小細胞肺腺癌細胞 NCI-H157細胞
人肺鱗癌細胞 NCI-H520細胞
人肺巨細胞癌高轉移細胞株 PG-BE1細胞
人肺巨細胞癌低轉移細胞株 PG-LH7細胞
人肺癌細胞 A-427細胞
人低分化肺腺癌細胞 SK-LU-1細胞
人肺支氣管癌細胞 NCI-H1650細胞
人非小細胞肺腺癌細胞 NCI-H1975細胞
人非小細胞肺腺癌細胞 NCI-H2087細胞
人小細胞肺癌細胞 NCI-H2227細胞
人非小細胞肺癌細胞 NCI-H23細胞
人肺腺鱗癌細胞 NCI-H596細胞
人非小細胞肺癌細胞，NCI-H838細胞
人肺鱗癌細胞 LTEP-s細胞
人小細胞肺癌細胞 LTEP-sm細胞
人肺鱗癌瘤株 LTEP-s細胞
人肺鱗癌細胞 NCI-H1703細胞
人肺鱗癌細胞 NCI-H2170細胞
人非小細胞肺癌細胞 NCI-H524細胞
人肺腺癌細胞 SPC-A1細胞
人肺癌細胞 A549細胞
人非小細胞肺癌細胞 H125細胞
人肺癌細胞 H1299細胞
人肺癌細胞 TKB-1細胞
人肺腺癌細胞，LTEP-a-2細胞
人肺腺癌細胞，Lu-165細胞
人大細胞肺癌細胞，NCI-H460細胞
人肺腺癌細胞，SPC-A-1細胞
人高轉移肺癌細胞，095-D細胞
人肺鱗癌細胞，SK-MES-1細胞
人大細胞肺癌細胞，NCI-H661細胞
人肺黏液上皮樣癌細胞，NCI-H292細胞
人肺退行性癌細胞，Calu-6細胞
人肺腺癌細胞，NCI-H1395細胞
人非小細胞肺癌細胞，NCI-H358細胞
人非小細胞肺癌細胞，HCC827細胞
人典型小細胞肺癌細胞，NCI-H1688細胞
人非小細胞肺癌細胞，NCI-H1299細胞
人胚肺二倍體細胞，2BS細胞
人支氣管上皮樣細胞，BEAS-2B細胞
人胚肺成纖維細胞，CCC-HPF-1細胞
人胚胎氣管組織來源細胞，CCC-HBE-2細胞
人肺腺癌細胞，Calu-3細胞
人小細胞肺癌細胞，DMS 153細胞
人高轉移肺癌細胞，95-D細胞
人低分化肺腺癌細胞，GLC-82細胞
人肺細胞，HLF-a細胞
人胚肺二倍體細胞，HEL-1細胞
人胚肺二倍體細胞，HEL-2細胞
人肺癌細胞，H1299細胞
人胚肺二倍體細胞，KMB-17細胞
人胚肺細胞系，KuMA細胞
人肺鱗癌細胞，LTEP-s細胞
人小細胞肺癌細胞，LTEP-sm細胞
人肺鱗癌瘤株，LTEP-s細胞
人胚胎心肌組織來源，CCC-HEH-2細
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人臍靜脈內皮細胞（人膀胱癌細胞污染），ECV-304細胞
人胚胎心臟成纖維樣細胞，HEH2細胞
人肝癌細胞，BEL-7402細胞
人胚胎腸粘膜組織來源細胞，CCC-HIE-2細胞
人正常肝細胞，L-02細胞
人胰腺癌細胞，PANC-1細胞
人肝癌細胞，Hep G2細胞
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人肝癌細胞，HuH-7細胞
人結直腸腺癌細胞，HCT-8細胞
人結直腸腺癌細胞，HT-29細胞
人結直腸腺癌細胞，COLO 205細胞
人十二脂腸腺癌，HuTu-80細胞
人結直腸腺癌細胞，HCT 116細胞
人結直腸腺癌細胞，LoVo細胞
人胰腺腺泡上皮癌，HPAC細胞
人結直腸腺癌細胞，SW620細胞
人胰腺癌細胞，AsPC-1細胞
人胃癌細胞，MKN-45細胞
人胃腺癌細胞，SGC-7901細胞
人胰腺導管癌細胞，CFPAC-1細胞
人食管癌細胞，EC109細胞
人食管癌細胞，NEC細胞
人結腸腺癌細胞，LS 180細胞
人結直腸腺癌瘤株，HCT 116細胞
人結直腸腺癌細胞，COLO 201細胞
人結直腸癌細胞，DiFi細胞
人肝癌細胞，Hep-3B細胞
人肝腹水腺癌細胞，SK-HEP-1細胞
人肝癌細胞，HHCC細胞
人肝癌細胞，HB611細胞
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人胰腺腺癌細胞，BxPC-3細胞
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人胃癌細胞（未分化），HGC-27細胞
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人結直腸腺癌細胞，LS 174T細胞
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人肝癌細胞，QGY-7703細胞
人肝癌細胞，SMMC-7721細胞
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人肝癌細胞，BEL-7404細胞
人肝癌細胞，BEL-7405細胞
人結直腸腺癌細胞，Caco-2細胞
