正式試驗
(1)取小鼠50只,體重20±2g,♀♂各半,隨機分為5組,10只/組。
(2)劑量 按等比級數增減,相鄰兩劑量比值1:0.6~0.9,設4~5個劑量組。
(3)給藥 普魯卡因溶液,ip。5個劑量組。
(4)統計 按改良寇氏法公式進行計算。
LD50=lg-1[Xm-i(∑P-0.5)] (公式1)
Xm:zui大劑量組劑量對數值
i:相鄰兩組劑量高劑量與低劑量之比的對數(相鄰兩組對數劑量的差值)
P:各組動物死亡率,用小數表示(如果死亡率為80%應寫成0.80)
∑P:各組動物死亡率之總和
n:每組動物數
Sx50= i× (公式2)
Sx50:logLD50的標準誤
X50=logLD50
LD50的95%可信限=log-1(X50±1.96Sx50) (公式3)
LD50的平均可信限=LD50±(LD50的95%可信限的高限-低限)/2 (公式4)
【結果】 填入表11。
表11 各組小鼠用藥、死亡情況及有關計算
【目的】
掌握LD50測定方法及計算過程。
【原理】將一定濃度和一定體積的藥物,按一定比例灌胃給予小鼠,觀察7日,記錄不同劑量小鼠的死亡情況,計算半數致死量,以確定藥物急性毒性。
【器材】 鼠籠、燒杯、1ml注射器等。
【藥品】 普魯卡因溶液(5個劑量)
【動物】 小鼠
【方法】
1.預試驗 模實驗劑量范圍,找出引起0~100%的估計致死量。
組別 動物數 劑量 對數劑量 死亡率 P 2 其他數據
(n) (mg/kg) (X) (P)
【注意】
1、預試驗要摸準藥物引起0和100%死亡率劑量的所在范圍。
2、正式試驗時各劑量按等比級數分組,應避免zui大劑量組的死亡小于80%,zui小劑量組死亡率大于20%,否則改用其他方法計算。
3、室溫:20℃為宜。
4、認真觀察中毒癥狀情況。
【思考題】
1、半數致死量(LD50)測定的目的意義如何?
2、半數致死量(LD50)常用的計算方法有哪些?