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過氧化物酶標記測定法
原理：脫氧核糖核苷酸衍生物地高[（digoxigenin）-11-dUTP]在TdT酶的作用下，可以摻入到凋亡細胞雙鏈或單鏈DNA的3-OH末端，與dATP形成異多聚體，并可與連接了報告酶（過氧化物酶或堿性磷酸酶）的抗地高抗體結(jié)合。在適合底物存在下，過氧化物酶可產(chǎn)生很強的顏色反應，特異準確的定位出正在凋亡的細胞，因而可在普通光學顯微鏡下進行觀察。
毛地黃植物是地高的*來源。在所有動物組織中幾乎不存在能與抗地高杭體結(jié)合的配體，因而非特異性反應很低。抗地高的特異性抗體與脊椎動物甾體激素的交叉反應不到1％，若此抗體的Fc部分通過蛋白酶水解的方法除去后，則可*排除細胞Fc受體非特異性的吸附作用。
本方法可以用于福爾馬林固定的石蠟包埋的組織切片、冰凍切片和培養(yǎng)的或從組織中分離的細胞凋亡測定。
(一)試劑配制
1、磷酸緩沖液PBS（pH7.4）：磷酸鈉鹽 50mM，NaCl 200mM。
2、蛋白酶K（200μg/ml，pH7.4）：蛋白酶K 0.02g；PBS 100ml。
3、含2%H2O2的PBS緩沖液（pH7.4）：H2O2 2.0ml；PBS緩沖液 98.0ml。
4、TdT酶緩沖液（新鮮配）：Trlzma堿 3.63g用 0.1N HCl調(diào)節(jié)pH至 7.2，加ddH2O定容到1000ml；再加入二甲砷鈉 29．96g和化鈷0.238g。
5、TdT酶反應液：TdT酶32μl；TdT酶緩沖液 76μl，混勻，置于冰上備用。
6、洗滌與終止反應緩沖液：化鈉 17. 4g；檸檬酸鈉 8.82g；ddH2O 1000ml
7、0.05％二氨基聯(lián)苯（DAB）溶液：DAB 5mg；PBS 10ml，pH7.4, 臨用前過濾后，加過氧化氫至0.02%。
8、0.5％甲基綠（pH4.0）：甲基綠0.5g；0.1M乙酸鈉100ml。
9、100％丁醇，100％、95％、90％、80％和70％乙醇，二甲苯，10％中性甲醛溶液，乙酸，松香水等。
10、過氧化物酶標記的抗地高抗體（ONCOR）
人胰腺癌細胞，AsPC-1細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人胃癌細胞，MKN-45細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人胃腺癌細胞，SGC-7901細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人胰腺導管癌細胞，CFPAC-1細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人食管癌細胞，EC109細胞
人食管癌細胞，NEC細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人結(jié)腸腺癌細胞，LS 180細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人結(jié)直腸腺癌瘤株，HCT 116細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人結(jié)直腸腺癌細胞，COLO 201細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人結(jié)直腸癌細胞，DiFi細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人肝癌細胞，Hep-3B細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人肝腹水腺癌細胞，SK-HEP-1細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人肝癌細胞，HHCC細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人肝癌細胞，HB611細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人胃腺癌細胞，AGS細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人肝癌細胞，HuH-7細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人結(jié)直腸腺癌細胞，HCT-8細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人結(jié)直腸腺癌細胞，HT-29細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人結(jié)直腸腺癌細胞，COLO 205細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人十二脂腸腺癌，HuTu-80細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人結(jié)直腸腺癌細胞，HCT 116細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人結(jié)直腸腺癌細胞，LoVo細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人胰腺腺泡上皮癌，HPAC細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
人結(jié)直腸腺癌細胞，SW620細胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）含說明書（傳代方法，培養(yǎng)條件，血清，培養(yǎng)基等）
