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LM-PCR Ladder (連接介導的PCR檢測)
當凋亡細胞比例較小以及檢測樣品量很少(如活體組織切片)時,直接瓊脂糖電泳可能觀察不到核DNA的變化。通過LM-PCR,連上特異性接頭,專一性地擴增梯度片段,從而靈敏地檢測凋亡時產生梯度片段。此外,LM-PCR 檢測是半定量的,因此相同凋亡程度的不同樣品可進行比較。如果細胞量很少,還可在分離提純DNA后,用32P-ATP和脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)使DNA標記,然后進行電泳和放射自顯影,觀察凋亡細胞中DNA ladder的形成。
上述兩種方法都針對細胞凋亡晚期核DNA斷裂這一特征,但細胞受到其它損傷(如機械損傷,紫外線等)也會產生這一現象,因此它對細胞凋亡的檢測會受到其它原因的干擾。需結合其它的方法來檢測細胞凋亡。
emerase Detection (端粒酶檢測)
端粒酶是由RNA和蛋白組成,它可以自身RNA為模板逆轉錄合成端粒區重復序列,使細胞獲得“永生化"。正常體細胞是沒有端粒酶活性的,每分裂一次,染色體的端粒會縮短,這可能作為有絲分裂的一種時鐘,表明細胞年齡、復制衰老或細胞凋亡的信號。研究發現,90%以上的癌細胞或凋亡細胞都具有端粒酶的活性。
mRNA水平的檢測:
研究者們發現了很多在細胞凋亡時表達異常的基因,檢測這些特異基因的表達水平也成為檢測細胞凋亡的一種常用方法。據報道,Fas 蛋白結合受體后能誘導癌細胞中的細胞毒性T細胞(cytotoxic T cells)等靶細胞。Bcl-2 和bcl-X (長的) 作為抗凋亡(bcl-2 和bcl-X)的調節物,它們的表達水平比例決定了細胞是凋亡還是存活。用熒光定量PCR技術來檢測基因表達水平無疑比之前者更快更準確。通過檢測fas, bax-alpha 和 bcl-X (長的) 基因的 mRNA表達水平來進行細胞凋亡的檢測。
細胞內氧化還原狀態改變的檢測:
正常狀態下,谷光苷肽(GSH)作為細胞的一種重要的氧化還原緩沖劑。細胞內有毒的氧化物通過被GSH還原而定期去除,氧化型的GSH又可被GSH還原酶迅速還原。這一反應在線粒體中尤為重要,許多呼吸作用中副產物的氧化損傷將由此被去除。當細胞內GSH的排除非常活躍時,細胞液就由還原環境轉為氧化環境,這可能導致了凋亡早期細胞線粒體膜電位的降低,從而使細胞色素C(三羧酸循環中的重要組分)從線粒體內轉移到細胞液中,啟動凋亡效應器caspase的級聯反應。
人肝癌細胞,HHCC細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人肝癌細胞,HB611細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人胃腺癌細胞,AGS細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人肝癌細胞,HuH-7細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人結直腸腺癌細胞,HCT-8細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人結直腸腺癌細胞,HT-29細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人結直腸腺癌細胞,COLO 205細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人十二脂腸腺癌,HuTu-80細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人結直腸腺癌細胞,HCT 116細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人結直腸腺癌細胞,LoVo細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人胰腺腺泡上皮癌,HPAC細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人結直腸腺癌細胞,SW620細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人胰腺癌細胞,AsPC-1細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人胃癌細胞,MKN-45細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人胃腺癌細胞,SGC-7901細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人胰腺導管癌細胞,CFPAC-1細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人食管癌細胞,EC109細胞
人食管癌細胞,NEC細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人結腸腺癌細胞,LS 180細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人結直腸腺癌瘤株,HCT 116細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人結直腸腺癌細胞,COLO 201細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人結直腸癌細胞,DiFi細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人肝癌細胞,Hep-3B細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)
人肝腹水腺癌細胞,SK-HEP-1細胞(T25培養瓶@密度75%)含說明書(傳代方法,培養條件,血清,培養基等)