原代培養：
1.取出小鼠后瀝干酒精，放入超凈臺內，固定在泡沫板上。
2.用鑷子提起皮膚，用解剖剪剪開皮膚一個橫切口，將皮膚向上撕開，然后剪開肌肉等，暴露出腹腔，在左側找到脾臟，用彎頭眼科鑷取出脾臟，置于無菌培養皿中。
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3.用生理鹽水將取出的脾臟清洗多次，并剔除多余無用的組織。
4.將篩網置于平皿中，脾臟置于篩網上，用彎頭鑷鑷住，輕輕在篩網上進行碾磨，同時不停滴加不含血清的培養液沖洗。
5.將碾磨好的細胞懸液吸入至離心管中，離心(1000rpm,5min)，吸去上清（去除血液等）。
6.加入10ml培養液，吹打混勻，取樣計數。
7.將稀釋好的細胞懸液分裝于培養瓶中，輕輕搖晃混勻，在培養瓶上。
面做好標志，注明細胞、組別及日期。然后將培養瓶置于二氧化碳培養箱中培養。
（2）傳代培養：
1.倒置顯微鏡下觀察細胞形態，確定細胞是否需要傳代。
2.培養液瓶打開后，過酒精燈火焰，置酒精燈火焰周圍。
3.拿出直頭滴管，套上橡皮吸頭，過火，放入培養液瓶中。
4.打開培養瓶，瓶口過火，將培養瓶內的培養液輕輕倒入廢液缸，用2-3mLPBS洗去殘留的舊培養基。
5.培養瓶加入0.25%胰酶，用量以薄薄蓋滿一層為宜，37℃消化，倒置顯微鏡下觀察到細胞收回突起變圓時立即翻轉培養瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉，加入少量的含血清的新鮮培養基。
6.取彎頭滴管反復吹打細胞使其脫壁并分散，再根據分傳瓶數補加一定量的含血清的新鮮培養基，制成細胞懸液，然后分裝到新培養瓶中。蓋上瓶蓋，適度擰緊后再稍回轉，以利于CO2氣體的進入，將培養瓶放回CO2培養箱。
7.對半貼壁培養細胞，不需胰酶，直接吹打，加入新鮮培養基，然后分裝到各瓶中。
（3）凍存：
1.吸取傳代后的細胞懸液，離心，去除培養液，加入凍存液，分裝凍存管（凍存管內細胞數目一般為（5～10）×106個/ml，2ml凍存管中一般放1～1.5ml細胞）。
2.按步凍存
o冷凍保存方法一：標準的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。
o冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之程序降溫機中每分鐘降1～3℃至-80℃以下，再放入液氮長期保存。
（4）復蘇：
1.取出冷凍管，立即放入37℃水浴箱中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化，移入無菌操作臺內。
2.打開凍存管，將細胞懸液吸到離心管中。
3.1000rpm離心10分鐘，棄去上清液。
4.加適當培養液后將細胞轉移至培養瓶中，37℃培養，第二天觀察生長情況。
人肺腺癌細胞 SPC-A1細胞 規格（T25培養瓶@密度75%）
人肺癌細胞 A549細胞 規格（T25培養瓶@密度75%）
人非小細胞肺癌細胞 H125細胞 規格（T25培養瓶@密度75%）
人肺癌細胞 H1299細胞 規格（T25培養瓶@密度75%）
人肺癌細胞 TKB-1細胞 規格（T25培養瓶@密度75%）
人肺腺癌細胞，LTEP-a-2細胞 規格（T25培養瓶@密度75%）
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人大細胞肺癌細胞，NCI-H460細胞 規格（T25培養瓶@密度75%）
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人大細胞肺癌細胞，NCI-H661細胞（T25培養瓶@密度75%）
人肺黏液上皮樣癌細胞，NCI-H292細胞 （T25培養瓶@密度75%）細胞說明書
人肺退行性癌細胞，Calu-6細胞（T25培養瓶@密度75%）細胞說明書
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人支氣管上皮樣細胞，BEAS-2B細胞
人乳腺癌細胞，Hs 578T細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
人乳腺癌細胞，MDA-MB-468-06細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
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人羊膜細胞，HA細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
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人卵巢癌細胞，A2780細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
人宮頸癌細胞，H1HeLa細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
人卵巢癌細胞，Caov-3細胞 （1×T25培養瓶#密度75% 提供技術服務）
