細胞：CIA-FLS細胞
中文名稱：大鼠關節滑膜成纖維細胞
生長特性：貼壁細胞
培養基：1640培養基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）
熒光株：CIA-FLS-RFP熒光標記細胞株 CIA-FLS-GFP熒光標記細胞株 CIA-FLS-LUC熒光標記細胞株
耐藥株：CIA-FLS-DDP耐藥株 CIA-FLS-PTX耐藥株 CIA-FLS-ADM耐藥株
細胞檢測服務：CIA-FLS細胞種屬鑒定（細胞檢測技術服務可直接咨詢客服 ）
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ACP核酸檢測（PCR熒光探針法）
實驗目的：檢測動物肺臟、淋巴結等組織中鸚鵡熱衣原體(ACP)DNA，用于鸚鵡熱衣原體(ACP)感染的輔助診斷及流行病學調查。其檢測結果僅供參考。
實驗方法：選取一對ACP特異性引物和一條特異性熒光探針，應用堿裂解法提取DNA，在耐熱DNA聚合酶（Taq酶）作用下，配以FQ-Buffer(內含Mg2+、Tris-HCl等)、四種核苷酸單體（dNTPs）等成分，通過PCR-熒光探針體外擴增法對鸚鵡熱衣原體(ACP)一段高保守區域進行擴增，從而達到快速實時定量檢測之目的。
動物組織標本采集：取發病動物肺臟、淋巴結等組織1g左右，轉至1.5ml離心管中。
標本預處理：
提取組織：取約100mg組織加1ml生理鹽水，研磨成組織勻漿，取50ul勻漿液轉至一潔凈的1.5ml離心管中。
組織DNA提取：向標本中加入50ul核酸提取液充分混勻，100℃烈解10min。13,000rpm 離心3min，取上清液4ul做PCR反應。
陰性質控品：取50μl陰性質控品加入50μl核酸提取液B，充分震蕩。后100℃裂解10分鐘，然后13,000rpm離心3分鐘，取上清液4μl做PCR反應。
ACP-陽性質控品：直接取4μl進行PCR擴增。或按照PCR擴增介紹方法進行定量分析。
貼壁細胞簽收操作：
1. 收到細胞后請盡快更換為含 15% 血清的新鮮培養基，如因特殊情況需要繼續使用原瓶培養基，請在原瓶培養基中額外添加 10% 的血清（原瓶培養基的繼續使用時間最長不宜超過 72 小時）
2. 貼壁細胞收到后切忌立刻進行消化，將細胞換液后放置培養箱孵育 6-8 小時或過夜再做消化傳代。
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細胞常規培養傳代流程（ 請嚴格遵照無菌操作）
1． 吸出原培養瓶中的培養基，PBS 緩沖液潤洗細胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞（注意把握消化時間，通常控制在 1-2min）
2． 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培養基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。
3． 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中，添加適當的培養基，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養。
4． 注意培養基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或者凍存。
