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(EFM-19細胞)乳腺癌細胞培養說明

時間:2023/11/27閱讀:1162
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細胞:EFM-19細胞

中文名稱:人乳腺癌細胞

生長特性:貼壁細胞

培養基:1640培養基  血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)

熒光株:EFM-19-RFP熒光標記細胞株  EFM-19-GFP熒光標記細胞株 EFM-19-LUC熒光標記細胞株

耐藥株:EFM-19-DDP耐藥株  EFM-19-PTX耐藥株  EFM-19-ADM耐藥株

細胞檢測服務:EFM-19細胞鑒定(細胞檢測技術服務可直接咨詢客服 )

(網絡信息主針對網絡推廣作用,僅供參考,細胞培養請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)


ADV核酸檢測實驗

實驗目的:檢測動物血清或血漿、肝、脾、淋巴結組織等樣本中(ADV)DNA,其檢測結果僅供臨床參考。

實驗原理:選取一對(ADV)特異性引物和一條特異性熒光探針,應用堿裂解法提取DNA,后者在耐熱DNA聚合酶(Taq酶)作用下,配以FQ-Buffer(內含MgP2+P、Tris-HCl等)、四種核苷酸單體(dNTPs)等成分,通過PCR-熒光探針體外擴增法對(ADV)進行擴增,從而達到快速實時定量檢測之目的。

適用標本類型:疑似動物血清或血漿、肝、脾、淋巴結組織和咽拭子等樣本。


標本采集:

血清:用無菌注射器抽取受檢動物靜脈血2毫升,注入無菌5ml干燥管(或含促凝劑),立即輕輕顛倒管子混合5至10次,密閉送檢。

肝、脾、淋巴結等組織:取可疑部位組織1g,轉至一潔凈的1.5ml的離心管中,密閉送檢。

保存和運輸:標本可立即用于測試, 2-8℃保存下不應超過24小時; -70℃以下長期保存。避免反復凍融。標本運送時應采用0℃冰壺。

 

細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)

1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)

2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。

3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。

4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或者凍存。


貼壁細胞簽收操作:

1. 收到細胞后請盡快更換為含 15% 血清的新鮮培養基,如因特殊情況需要繼續使用原瓶培養基,請在原瓶培養基中額外添加 10% 的血清(原瓶培養基的繼續使用時間最長不宜超過 72 小時)

2. 貼壁細胞收到后切忌立刻進行消化,將細胞換液后放置培養箱孵育 6-8 小時或過夜再做消化傳代。

(網絡信息主針對網絡推廣作用,僅供參考,細胞培養血清注意事項請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)


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