細胞：H1944細胞
中文名稱：人非小細胞肺癌細胞
生長特性：貼壁細胞
血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清） 培養基：1640培養基
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細胞常規培養傳代流程（ 請嚴格遵照無菌操作）
1． 吸出原培養瓶中的培養基，PBS 緩沖液潤洗細胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞（注意把握消化時間，通常控制在 1-2min）
2． 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培養基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。
3． 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中，添加適當的培養基，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養。
4． 注意培養基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或者凍存。
支氣管炎病毒(AIBV)核酸檢測：RNA提取
1:樣品處理
固體組織：取50mg左右組織用玻璃勻漿器勻漿或剪刀剪碎，加入500ul RNA提取液A（Trizol reagents），研磨或振蕩至勻漿狀，轉移到1.5ml的EP管中，室溫放置5min。
培養物、試子等液體標本：將標本充分混勻，取100μ液體標本加入500μl RNA提取液A（Trizol reagents）充分震蕩，室溫放置5min。
2:加入100ul氯仿，用力震蕩15s，室溫靜置5min， 4℃ 13,000rpm離心5min。
3:小心將上層水相轉移到干凈離心管中，加300 μl 無水乙醇，另加10ul RNA提取液B（內含不溶物，使用前室溫溶解并充分混勻），充分混勻，13,000rpm離心1min。
4:棄上清，加入500ul 75%的DEPC乙醇，充分混勻，13,000rpm離心1min，小心吸去大部分乙醇。
5:將提取管敞口在室溫空氣中干燥5min待乙醇揮發干凈，用20μl DEPC H2O溶解沉淀。
陰性質控品：取100μl陰性質控品加入500μl RNA提取液A（Trizol reagents）充分震蕩，室溫放置5min。后按2-5操作。
AIBV陽性質控品: 直接取3μl 進行PCR擴增。
