細胞:MCFs細胞
中文名稱:小鼠心肌成纖維細胞
生長特性:貼壁
培養(yǎng)基:DMEM-H培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當的培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
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細胞凋亡(apoptosis):
也稱為細胞程序性死亡(programmed cell death,PCD),是由細胞自身的程序性zisha機制激活的細胞死亡現(xiàn)象。
在多細胞真核生物中,程序性的細胞死亡是由細胞表面的死亡受體介導,通過一系列的半胱an酸蛋白酶(caspases)作用而啟動,維系個體結構穩(wěn)定、功能平衡和生長發(fā)育所必需的基本生物學過程。
一般存在于個體的發(fā)育過程中,導致細胞功能和形態(tài)學上的改變,如蛋白質的水解、DNA和RNA的降解、細胞的收縮,以及細胞碎裂形成凋亡小體(apoptotic bodies)等,并最終導致細胞的死亡。
在細菌中,個體的細胞或細胞群體在其生活周期中也存在著程序性死亡現(xiàn)象.這是目前微生物學研究的一個新的著力點。