細胞:MMEC細胞
中文名稱:小鼠乳腺上皮細胞
生長特性:貼壁
培養基:DMEM-H培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續消化)直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉移到新的培養皿中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4):注意培養基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
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在信號加工過程之間對相互作用進行特征分析,而這些加工過程由22個不同受體-配體對引發,總共有231對組合。
他們的切入點從檢查每一單個配體對于264.7RAW巨嗜細胞的效果開始,對鈣元素流、蛋白質磷酸化和細胞因子生產等結果進行定量分析。
獲得了這些單一的特征之后,他們繼續分析這些成對的引發物,接著將最終獲得的結果與以前預測將要在最為簡單的“額外"場景中發生的結果進行對比。
當獲得的結果與以前的預測有顯著差異時,他們認為在被刺激的各種途徑中存在著一種相互作用,導致了一種更為復雜的輸入-輸出關系的產生。
被研究的配體,在生產細胞因子的調節過程中都至少會和一個其它的配體發生協同性的交互作用,雖然甚至有幾個配體對這些過程并沒有顯示出獨立的效果。