細胞:RLSEC細胞
中文名稱:大鼠肝竇內皮細胞
生長特性:貼壁
培養基:DMEM-H培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續消化)直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉移到新的培養皿中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4):注意培養基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
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細胞的骨架是一個由長排的肌動蛋白通過alpha-輔肌動蛋白連接起來的網絡。
沿著骨架的邊緣(接近細胞膜的地方),alph-輔肌動蛋白分子擔任兩種工作:它們不但將長排的肌動蛋白抓在一起,而且還與整合素蛋白結合在一起。
(兔 CCC-SMC-1細胞 平滑肌細胞)(人 GLC-82 [GLC82]細胞 肺腺癌細胞)
每次運動,細胞會抓緊它沿著運動的表面,而這種骨架必須加固才能承受這種由運動產生的物理壓力。在細胞中,這類壓力會破壞alpha-輔肌動蛋白與肌動蛋白分子的連接并使細胞骨架不穩定。
(人 Hep-2 [Hep2]細胞 上皮細胞)(人 CCC-HSF-1細胞 成纖維細胞)
這種壓力會將alpha-輔肌動蛋白拽離肌動蛋白,但是alpha-輔肌動蛋白上的壓力會導致它拆開自己的一些結構并將形成的手臂延伸向紐帶蛋白。
(人 HT-1080細胞 肉瘤細胞)(人 JEG-3細胞 絨癌細胞)
而紐帶蛋白加固alpha-輔肌動蛋白分子與肌動蛋白的能力使骨架抵擋住細胞運動產生的壓力。