細胞:CMT93細胞
中文名稱:小鼠結腸癌細胞
生長特性:貼壁
培養基:DMEM-H培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
CMT93細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉移到新的培養皿中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4):注意培養基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
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“基因敲除"小鼠:
為了能夠研究PARL蛋白的功能,研究者們利用“PARL基因敲除"小鼠進行實驗,這些小鼠不能產生PARL蛋白。這些小鼠衰老退化很迅速——4周后喪失了肌肉力量,大大地降低了呼吸能力,并且8-12周后,它們死亡了。(小鼠B16細胞黑色素瘤細胞)(人C918細胞黑色素瘤細胞)
PARL基因的缺失導致了肌肉細胞的退化,這在正常衰老的過程中也會出現。這一結果驅使研究者繼續研究來找出PARL蛋白的功能。
(小鼠Cl.Ly1+2-/9細胞淋巴細胞)(人Daoy細胞髓母細胞瘤細胞)
控制細胞死亡:
細胞的生命周期是受某種方式所控制的——一種叫做細胞程序性死亡的機制。除了供應能量外,線粒體也擔負著確保細胞程序性死亡信號的整合和擴大的功能。
(大鼠H9c2細胞胚胎心肌細胞)(人HCC38細胞導管癌細胞)
PARL蛋白在線粒體中啟動了細胞程序性死亡。盡管PARL敲除小鼠的線粒體能正常發育并且能將氧轉換成能量,但是它們已經喪失了抵抗程序性死亡的能力,并且細胞死亡得更快。
(大鼠IR983F細胞骨髓瘤細胞)(小鼠J774A.1細胞單核巨噬細胞)
PARL蛋白在細胞死亡的過程中起著至關重要的作用,并且很可能在像帕金森等衰老疾病的起源具有重要作用。