細胞:E0771細胞
中文名稱:小鼠髓樣乳腺癌細胞
生長特性:貼壁
培養基:DMEM-H培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
E0771細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉移到新的培養皿中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4):注意培養基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
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如果僅僅將自我更新因子去除,干細胞還是會停留在自我更新狀態。只有加入了Mbd3細胞才會開始分化為特定的細胞,有助于了解小鼠胚胎干細胞和人類胚胎干細胞之間的不同。小鼠胚胎干細胞需要蛋白LIF以幫助自我更新;
(大鼠L6細胞 成肌細胞)(小鼠LA795細胞 肺腺癌細胞)
人類胚胎干細胞中不需要LIF。而Mbd3缺失的小鼠胚胎干細胞則出現像人類干細胞的現象:不需要LIF以進行自我復制。因此這種胚胎干細胞可以作為一種人類干細胞研究模式,因為它不要LIF以繼續復制。
(小鼠LtK-11細胞結締組織細胞)(兔N/N1003A細胞晶體上皮細胞)
Mbd3是重塑核小體與組蛋白去乙酰化復合物其中的一部分。此復合物起到表觀沉默作用,在細胞中對基因表達進行調控;