細胞:EMT6細胞
中文名稱:小鼠乳腺癌細胞
生長特性:貼壁
培養基:L15培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
EMT6細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉移到新的培養皿中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4):注意培養基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
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再將這種皮膚移植給無毛小鼠。一些細胞與這些標記細胞混合形成了發育的毛nang,但另外一些毛nang則由標記的細胞構成。每個后裔細胞為毛nang中八種不同的細胞類型形成作出了貢獻。
(人EC109細胞食管癌細胞)(人HCT-15細胞 HCT15細胞直腸腺癌細胞)
125天后,從移植物中取得活組織切片并將標記的干細胞分離出來進行亞克隆、培養,然后再次進行移植。
(人LS 174T細胞 LS174T細胞直腸腺癌細胞)(人MDA-MB-468細胞乳癌細胞)
結果發現這種大鼠的胡須干細胞再次參與了形成毛nang和脂肪腺所需的所有細胞類型的形成過程,從而使hair bulb再次進入正常的生長、靜息和擴增階段。
(小鼠MPC-11細胞)(人NCI-H1650細胞肺支氣管癌細胞)
毛nang干細胞不斷更新所有毛nang和脂肪腺細胞類型的能力對再生醫學具有重要應用價值。