細胞：ESC-410細胞

中文名稱：人食管癌細胞

生長特性：貼壁

培養(yǎng)基：1640培養(yǎng)基  血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

ESC-410細胞傳代：

1）：細胞密度約80%時，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞（注意根據(jù)實際情況，把握消化時間）。

2）：鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時；

（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處，即可肉眼可見細胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。

3）：取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員，以細胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細胞庫管理員，避免不必要的損失；）

禽白血病病毒(ALV)核酸擴增檢測試劑盒說明書(PCR-熒光探針法 )

實驗?zāi)康?適用于檢測發(fā)病動物羽髓、肝臟、脾臟、淋巴結(jié)、骨髓及腫瘤等固體組織、體液以及病毒細胞培養(yǎng)液中禽白血病病毒(ALV) J亞群DNA，適用于禽白血病病毒(ALV) J亞群感染的輔助診斷及流行病學(xué)調(diào)查，其檢測結(jié)果僅供參考。

實驗原理：用一對禽白血病病毒(ALV) J亞群特異性引物和一條特異性熒光探針， 經(jīng)過裂解提取DNA，后者在Taq酶作用下，配以FQ-Buffer(內(nèi)含Mg2+、Tris-HCl等)、四種核苷酸單體（dNTPs）等成分，用PCR-熒光探針法對禽白血病病毒(ALV) J亞群DNA進行擴增，從而達到實時快速定量檢測之目的。

實驗組成：

核酸提取液B 4管(500ul/管)   Taq酶系 1管（80ul/管） ALV PCR MIX 1管（960μl/管）

ALV陽性質(zhì)控品 1管（50μl/管(1×107Ccopies/ml)） 陰性質(zhì)控品 1管（500μl/管）

實驗標(biāo)本采集：

適用標(biāo)本類型：發(fā)病動物羽髓、肝臟、脾臟、淋巴結(jié)、骨髓及腫瘤等固體組織、體液以及病毒細胞培養(yǎng)液。

標(biāo)本采集：  

固體組織標(biāo)本：取發(fā)病動物羽髓、肝臟、脾臟、淋巴結(jié)及腫瘤等組織約1g，置入1.5ml潔凈EP管，立即送檢。

體液及病毒液：取上述標(biāo)本約1ml，置入1.5ml潔凈EP管，立即送檢。

血清：無菌條件下取全血2-3ml，轉(zhuǎn)至5ml干燥管或促凝管中，上下顛倒3-5次混勻，密閉送檢。

保存和運輸：上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃，長期保存可置-70℃。但不能超過6個月，標(biāo)本運送應(yīng)采用0℃冰壺。