細胞:HSC6細胞
培養基:DMEM-H培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
中文名稱:人口腔鱗癌細胞
生長特性:貼壁
收到細胞后請盡快更換配套培養基,或自己配置的新鮮培養基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續使用原瓶培養基,請在原瓶培養基中額外添加10%的血清(原瓶培養基的繼續使用時間最長不宜超過72小時)。
HSC6細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉移到新的培養皿中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4):注意培養基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
(網絡信息主針對網絡推廣作用,僅供參考,細胞培養請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
正常對照組心肌細胞置于95% 空氣/5% CO2環境下培養. 結果顯示, 缺氧24 h能增加培養介質中NO, 硫代ba比妥酸反應產物(TBARS)和乳酸脫氫酶(LDH)水平, 再給氧降低培養介質中NO和水平, 增加TBARS和LDH水平.
(人HCCC-9810細胞膽管細胞型肝癌細胞)(人HGC-27細胞胃癌細胞)
缺氧上調bcl-2, p53和p21/waf1/cip1蛋白表達水平, 而再給氧下調bcl-2蛋白表達水平, 上調p53和p21/waf1/cip1蛋白表達水平.
(人HO-8910細胞卵巢癌細胞)(人HO-8910PM細胞卵巢癌細胞)
同時, 缺氧增加心肌細胞凋亡率, 而再給氧增加心肌細胞壞死率. NO供體硝普na(SNP)增加培養介質中和TBARS水平, 下調bcl-2蛋白表達而上調p53和p21/waf1/cip1蛋白表達水平, 增加DNA斷裂、凋亡及壞死細胞率. (人IMR-32細胞神經母細胞瘤細胞)(人KP-N-NS細胞腎上腺神經母細胞瘤細胞)
L-NAME和 SOD/CAT分別降低培養介質中和TBARS水平, 它們均能上調bcl-2蛋白表達而下調p53和p21/waf1/cip1蛋白表達水平, 抑制DNA斷裂、凋亡及壞死細胞率, 而D-NAME則無此作用.
(人LS 180細胞結腸腺癌細胞)(人LTEP-s細胞肺鱗癌細胞)
以上結果表明, 在缺氧再給氧所致心肌細胞死亡過程中, NO和氧自由基參與下調bcl-2蛋白表達水平和上調p53和p21/waf1/cip1蛋白表達水平, 相應地激發細胞凋亡程序, 并提示一氧化氮及氧自由基誘導心肌細胞凋亡的機制與調節 bcl-2, p53和p21/waf1/cip1信號通路有關.