細(xì)胞：HLMVEC細(xì)胞
中文名稱：人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí)）。
HLMVEC細(xì)胞傳代：
1）：細(xì)胞密度約80%時(shí)，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意根據(jù)實(shí)際情況，把握消化時(shí)間）。
2）：鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)；
（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，即可肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）
直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。
3）：取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。
（網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；）
人類單倍體細(xì)胞系——每個(gè)細(xì)胞均只包含23條染色體的單個(gè)副本。為了生成這些細(xì)胞，研究人員借助了稱作為CRISPR/Cas9的基因編輯技術(shù)。
（人SGC-7901細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人胃腺癌細(xì)胞）
由于缺少第二基因拷貝大大簡(jiǎn)化了基因失活，人類近單倍體細(xì)胞系成為了遺傳篩查和基因組工程的重要工具。然而，一直以來(lái)缺乏人類單倍體細(xì)胞系，阻礙了對(duì)某些基因的遺傳操控。（人HSF細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人皮膚成纖維細(xì)胞 ）
除15號(hào)染色體的一個(gè)30兆堿基(megabase)的雜合片段外，人類近單倍體細(xì)胞系HAP1包含了所有染色體的單個(gè)副本。這一大的片段具有330個(gè)基因，被整合到了19號(hào)染色體的長(zhǎng)臂上。（小鼠P815細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù)小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞）
我們的手邊擁有了這種近單倍體細(xì)胞系，但它包含的這一15號(hào)染色體大片段讓我們感到非常困擾。這一片段達(dá)到了最小染色體的一半大小，因此是一個(gè)相當(dāng)大的dna片段。
（人HSC細(xì)胞 人肝星狀細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù)）
希望能夠除去這一添加在19號(hào)染色體中的DNA大片段，使得檢測(cè)15號(hào)染色體上的基因功能變得更加的容易。利用二倍體細(xì)胞開(kāi)展研究，如果你在一個(gè)拷貝的基因中導(dǎo)入突變，它的效應(yīng)可以被另一個(gè)拷貝所掩蓋；（HSG細(xì)胞 下頜下腺細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù)）
為了除去這一跨越330個(gè)基因，近3000萬(wàn)個(gè)堿基對(duì)的遺傳物質(zhì)，研究人員轉(zhuǎn)而借助了CRISPR/Cas9技術(shù)。設(shè)計(jì)出了一些引物，使得Cas9內(nèi)切核酸酶靶向這一多余片段的任一末端；（HSY細(xì)胞 腮腺上皮細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù)）
隨后篩查了生成的細(xì)胞系——大約400個(gè)不同的克隆，找到了正確刪除這一片段的細(xì)胞系。兩個(gè)克隆符合期望的最終產(chǎn)物：生成了沒(méi)有額外的15號(hào)染色體部分的單倍體細(xì)胞系。（人A2780細(xì)胞 人卵巢癌細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù)）
對(duì)于那些試圖闡明基因突變對(duì)于人類細(xì)胞影響的遺傳學(xué)家們來(lái)說(shuō)，這些單倍體細(xì)胞將很有用處。它還提供了第一個(gè)例子將CRISPR/Cas9系統(tǒng)用于這樣大的DNA片段。
