細胞:C8-B4細胞
中文名稱:小鼠腦神經細胞
生長特性:貼壁
培養基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
收到細胞后請盡快更換配套培養基,或自己配置的新鮮培養基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續使用原瓶培養基,請在原瓶培養基中額外添加10%的血清(原瓶培養基的繼續使用時間最長不宜超過72小時)。
C8-B4細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉移到新的培養皿中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4):注意培養基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
(網絡信息主針對網絡推廣作用,僅供參考,細胞培養請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
鴨肝炎病毒(DHV)核酸擴增檢測:
適用標本類型:測疑似動物(鴨、鵝等水禽)血清、泄殖腔試子(糞便)及組織(肝臟、淋巴結等)病樣組織標本以及細胞培養液。
標本采集:
1)組織:取發病動物肝及淋巴結等組織約1g,置入1.5ml潔凈EP管,立即送檢。
2)體液及培養液體:取上述標本約1ml,置入1.5ml潔凈EP管,立即送檢。
3)泄殖腔等試子:用棉試子取泄殖腔分泌物,將試子放入盛有1.0ml PBS(或生理鹽水)的離心管中,立即送檢。
標本保存和運輸:上述標本短期內可保存于-20℃,長期保存可置-70℃。但不能超過6個月,標本運送應采用0℃冰壺。
適用儀器:主要包括ABI GeneAmp PCR System7700、ABI GeneAmp PCR System7500、ABI PRISM 7300、LightCycler等毛細管的儀器,MJ Opticon系列或取得資格認證的定量PCR儀。
質控標準:
陰性質控品:全部陰性。
DHV陽性質控品:陽性質控品的Ct值均應小于30,且呈標準S型擴增曲線。
以上條件應同時滿足 ,否則,此次試驗視為無效,全部試驗應重新進行。