細胞:CHO細胞
中文名稱:倉鼠卵巢細胞
生長特性:貼壁
培養基:1640 培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
CHO細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉移到新的培養皿中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4):注意培養基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
收到細胞后請盡快更換配套培養基,或自己配置的新鮮培養基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續使用原瓶培養基,請在原瓶培養基中額外添加10%的血清(原瓶培養基的繼續使用時間最長不宜超過72小時)。
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綠膿桿菌在免疫系統較弱的人當中,可以引起嚴重的皮膚和肺部炎癥,特別是那些患有遺傳性疾病囊胞性纖維癥的人。當細菌進入人體細胞后,(人HEC-1-B細胞 來源:通派細胞庫 人子宮內膜腺癌細胞)Gb3脂質結合LecA蛋白并使細胞膜彎曲。在新研究中通過計算得出,這種結合足以將細菌包裹起來。
研究人員只熟悉細菌侵染的方法,(人Hs 578T細胞 來源:通派細胞庫 人乳癌細胞)包括操控宿主細胞內的信號。這項信號可控制肌動蛋白纖維——細胞的肌肉:這些纖維可使來自內部的細胞被膜彎曲,并形成膜泡,細菌被吸收進其中。
為了證明沒有肌動蛋白該過程一樣能運行,(人HuH-6細胞 來源:通派細胞庫 人肝母細胞瘤細胞)觀察了假單胞菌(Pseudomonas bacteria)對合成膜泡的影響。膜泡既不包含肌動蛋白,也不包含其他細胞組分,只有脂質Gb3。
當離體膜停靠到表面上時,(人JEG-3細胞 來源:通派細胞庫 人絨毛膜癌細胞)就在細菌周圍折疊和關閉。然而,只有當細菌產生LecA蛋白時,才會發生這個包裝過程。實驗表明,假單胞菌使用這種脂質拉鏈,使其自身進入細胞,而無需操控肌動蛋白。
研究人員證明,(人SW1116細胞 來源:通派細胞庫 人結腸腺癌細胞)LecA和Gb3對于細菌到人類肺細胞的入侵也非常重要:當這一對分子消失時,透過細胞的細菌數量減少了70%。這些研究結果使R?mer的研究小組能夠發現一種潛在的藥物,來對抗綠膿桿菌。