細胞：HASMC細胞

中文名稱：人主動脈平滑肌細胞

生長特性：貼壁

培養基：MEM+15%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO

HASMC細胞傳代：

1）：細胞密度約80%時，吸出原培養瓶中的培養基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞（注意根據實際情況，把握消化時間）。

2）：鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時；

（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處，即可肉眼可見細胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。

3）：取部分細胞懸液轉移到新的培養皿中，添加適當的培養基，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養。

4）：注意培養基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。

收到細胞后請盡快更換配套培養基，或自己配置的新鮮培養基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續使用原瓶培養基，請在原瓶培養基中額外添加10%的血清（原瓶培養基的繼續使用時間最長不宜超過72小時）。

（網絡信息主針對網絡推廣作用，僅供參考，細胞培養請咨詢細胞庫管理員，以細胞庫管理員提供給您的信息為準，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細胞庫管理員，避免不必要的損失；）

miR-17-92的表達被鎖定在“開"的位置上的Myc依賴型癌細胞——（人H2087細胞 來源：通派細胞庫 人非小細胞肺腺癌細胞）不論是在實驗室培養皿中生長的還是作為腫瘤在小鼠體內的——會不斷分裂，甚至在Myc表達被阻斷后也是如此。這提示Myc通過這個微RNA族起作用，從而施加它的致癌作用。

尋找受到Myc過度表達影響和受到miR-17-92影響的基因的重合部分。（人H2227細胞  來源：通派細胞庫 人小細胞肺癌細胞）這個研究組在這些基因中發現了大約401個基因同時因為Myc 和miR-17-92而表達增加或者受到抑制。選擇把重點放在那些被抑制的基因上，因為這些基因表現出了對微RNA的平均更多的結合部位。他們進一步篩選出了被超過1個miR-17-92結合部位調控的15個基因。

在這些基因中，有5個引人注目。其中4個基因為已知調控DNA如何緊密地圍繞蛋白質包裹起來(形成了稱為染色質的復合體)的蛋白質編碼。這種包裝對于讓DNA放進細胞核具有必要性，（人H596細胞  來源：通派細胞庫 人肺腺鱗癌細胞）但是這讓調控轉錄的蛋白質難以訪問基因。這4種受到Myc 和miR-17-92控制的蛋白質通過調控這個染色質的基因的可訪問性從而影響細胞的增殖和衰老。之前從未識別出它們是Myc 和miR-17-92的靶標。

第5個基因為一種稱為Bim的蛋白編碼，（人H1703細胞 來源：通派細胞庫 人肺鱗癌細胞）它能誘導細胞程序化死亡，即細胞凋亡。這種細胞殺路徑被身體用于清除受損或者不需要的細胞。此前有人報告說，Bim的表達受到了miR-17-92的影響。

值得注意的是，所有這些蛋白已知都能影響細胞增殖、（人H2170細胞 來源：通派細胞庫 人肺鱗癌細胞）進入細胞周期的一種休息狀態或者細胞凋亡，這部分是通過允許或禁止訪問染色質中的緊密包裹的DNA段起作用的。

Myc仍然是基因轉錄和表達的一個通用放大器，（人H69細胞 來源：通派細胞庫 人小細胞肺癌細胞）但是研究表明癌的狀態的維持依賴于一個更專注的機制。證明了抑制這5個目標基因的表達能有效模仿Myc過度表達，這部分緩解了Myc失去活性的影響。

至多30%的培養的Myc依賴型癌細胞在缺乏Myc表達的情況下繼續生長(相比之下只有11%的對照細胞繼續生長)，（人H249細胞  來源：通派細胞庫 人小細胞肺癌細胞）而小鼠的腫瘤在數周時間里或者沒能消退，或者出現了復發。