細胞:HK-2細胞
中文名稱:人腎小管上皮細胞
生長特性:貼壁
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
HK-2細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當的培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
收到細胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基,或自己配置的新鮮培養(yǎng)基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時)。
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在人類的健康腸道中,干細胞會不斷地彼此競爭得以生存,(小鼠MA-782細胞 來源:通派細胞庫 小鼠乳癌細胞)而在某一個時間某一個腸道區(qū)域往往只會存在一種特定數量的干細胞生存下來;然而當研究調查早期腫瘤組織中的干細胞時,發(fā)現隨著干細胞生存競爭的劇烈增加,干細胞的數量也在相應增加,這就明顯揭示了腸癌發(fā)生和干細胞活性之間的關系。
研究利用一種特殊開發(fā)的“工具盒”對人類機體的干細胞進行研究,(小鼠WEHI 164細胞 來源:通派細胞庫 小鼠纖維肉瘤細胞)這種新型工具盒可以隨機測定老化干細胞的突變情況,這種突變情況正表明了干細胞所發(fā)生的行為;研究開展前,關于人類腸道干細胞生物學的分子機制依然是個謎,而在這篇研究報道中研究者就解開了這一謎題;研究者利用小鼠進行試驗,(大鼠H4-ⅡE細胞 來源:通派細胞庫 大鼠肝細胞瘤)由于小鼠的腸道特性和人類的腸道特性具有明顯的相似性,因此利用小鼠進行研究得到的結果就可以轉化到人類機體中。
研究結果也可以應用于人類機體其他組織,比如皮膚、肺部和乳等;(人KMB-17細胞 來源:通派細胞庫 人胚肺二倍體細胞)揭示干細胞在人類腸道中的行為機制將是干細胞研究領域的一大飛躍,截至目前研究更多的是利用小鼠來進行研究或者是將干細胞置于自然環(huán)境中進行研究,這就扭曲了干細胞的正常行為表現;
研究利用開發(fā)的新型工具來揭示腸道干細胞的行為表現,(人HL 來源:通派細胞庫 人胚肺二倍體細胞)這就可以明顯增加研究人員對于腸癌發(fā)生的理解。通過對來自腸癌患者的組織進行分析研究,可以清楚揭示腸癌的發(fā)生機理,當然后期還需要進行更為深入的研究才能夠為開發(fā)治療腸癌患者的疾病以及改善其生存質量提供幫助。