細胞：RAEC細胞

中文名稱：大鼠主動脈內(nèi)皮細胞

生長特性：貼壁

RAEC細胞培養(yǎng)基：DMEM-L +10% FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

收到細胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時）。

RAEC細胞傳代：

1）：細胞密度約80%時，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞（注意根據(jù)實際情況，把握消化時間）。

2）：鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時；

（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處，即可肉眼可見細胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。

3）：取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員，以細胞庫管理員提供給您的信息為準，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細胞庫管理員，避免不必要的損失；）

如何挽救線粒體發(fā)生功能障礙細胞；

為了發(fā)現(xiàn)可挽救這些細胞的遺傳突變，Chen和Birsoy在白頭研究所前任研究人員Thijn Brummelkamp開發(fā)的一個單倍體遺傳系統(tǒng)中，模仿線粒體功能障礙。他們用抗霉素(antimycin)抑制線粒體功能后，發(fā)現(xiàn)ATPIF1基因鈍化的突變細胞可免于線粒體功能喪失。

（人RD細胞 來源：通派細胞庫 人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞）

atp酶抑制因子ATPIF1，是一個備份系統(tǒng)的一部分，可拯救饑餓的細胞。當細胞喪失氧氣和糖分時，平時生產(chǎn)ATP的一個線粒體復合物(稱為ATP合成酶)，會轉(zhuǎn)變成消耗ATP，這種狀態(tài)對于一個已經(jīng)饑餓的細胞可能是有害的。

（人TE671細胞 來源：通派細胞庫 人橫紋肌瘤細胞）

ATPIF1可與ATP合成酶相互作用，來關(guān)閉ATP合成酶，并阻止它消耗線粒體的ATP供應(yīng)，在這個過程中，線粒體膜電位也變得更壞。

（猴B95-8細胞 來源：通派細胞庫 絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細胞）

在這些線粒體功能障礙疾病中，某種意義上，這種狀態(tài)對于細胞是一種虛假的饑餓狀態(tài)——其實有充足的養(yǎng)分，但是因為線粒體正常功能被阻斷，線粒體就表現(xiàn)的好像沒有足夠的氧氣一樣。

（人HC-A細胞 來源：通派細胞庫 人軟骨細胞）

所以在這些情況下，激活ATPIF1并不好，因為周圍還有許多營養(yǎng)可提供ATP。相反，阻斷ATPIF1則具有治療性，因為這能夠使膜電位得以維持。

（小鼠F9細胞 來源：通派細胞庫 小鼠畸胎瘤細胞）

具有嚴重線粒體疾病的患者其肝細胞經(jīng)常受到影響，所以Chen和Birsoy檢測了線粒體功能障礙在對照小鼠和ATPIF1敲除小鼠肝細胞中的影響。與具有正常ATPIF1活性的肝細胞相比，具有ATPIF1抑制功能的肝細胞，再次更好地應(yīng)對了線粒體功能障礙。

（人KP-N-NS細胞 來源：通派細胞庫 人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞）

如果你擺脫了ATPIF1，你就會在線粒體功能障礙存在的情況下存活。根據(jù)目前為止我們所觀察到的結(jié)果，在小鼠中阻斷ATPIF1并沒有嚴重的副作用。