細(xì)胞:M14細(xì)胞
中文名稱:人黑色素瘤細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:L15+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
M14細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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為了構(gòu)建這個(gè)數(shù)學(xué)模型,研究人員將注意力放在兩種白細(xì)胞類型上,即巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞上。巨噬細(xì)胞是長(zhǎng)期存活的免疫系統(tǒng)垃圾處理細(xì)胞,而短命的嗜中性粒細(xì)胞則是免疫系統(tǒng)中聚集在感染位點(diǎn)并吞下入侵生物。
CaSki細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90% RPMI-1640、10% FBS
每種細(xì)胞類型都依賴它自己的一套功能性活性基因來(lái)實(shí)施它在抵抗感染中的特定任務(wù)。 巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞(和它們表達(dá)的基因)在成熟前是一摸一樣的。
CCC-HSF-1細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90% 高糖DMEM、10% FBS
兩種細(xì)胞都來(lái)自骨髓祖細(xì)胞。研究人員希望能夠知道骨髓祖細(xì)胞如何決定它們應(yīng)該變成巨噬細(xì)胞還是嗜中性粒細(xì)胞。這些巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞基因如何利用相同的一套基本調(diào)節(jié)因子來(lái)產(chǎn)生特定的基因表達(dá)模式呢?
CCD 841 CON細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90% 高糖DMEM、10% FBS
這些細(xì)胞的調(diào)節(jié)系統(tǒng)基本是由轉(zhuǎn)錄因子蛋白構(gòu)成,這種因子控制許多基因的活動(dòng)。