細胞:A498細胞
中文名稱:人腎癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:MEM+15%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
A498細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
(網絡信息主針對網絡推廣作用,僅供參考,細胞培養請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)

真核細胞質和細胞核是功能不同的兩個亞細胞部位,細胞核膜是二者分隔的重要屏障,(通派細胞庫供應:b.End3細胞株)核膜上分布的核孔復合體(nuclear pore complex, NPC)是溝通細胞核內外物質交流和信息交流的主要通道。
生物大分子經NPC跨核膜轉運(nucleocytoplasmic transport )是真核細胞基因復制、(通派細胞庫供應:Meth-A細胞株)轉錄和翻譯的必要環節,也是細胞內信號轉遞、參與細胞核反應(即細胞增殖、分化、凋亡等核反應)調控的重要環節。
一般而言,分子量低于60kD的生物分子可自由通過NPC出入細胞核,(通派細胞庫供應:Renca細胞株)而60kD以上的生物大分子通過NPC情形較為復雜,其核質轉運是一種耗能的需蛋白介導的主動轉運過程,無論是入核(import)轉運還是出核(export)轉運均需耗能。
該過程由核膜Ran蛋白水解GTP為轉運提供能量,(通派細胞庫供應:Hek-293細胞株)因此核質側核膜高RanGTP和胞質側核膜高RanGDP濃度的不對稱性是核質轉運的重要基礎。
需入核轉運的生物大分子通常有參與基因復制、(通派細胞庫供應:Hela細胞株)轉錄的蛋白因子和各種酶系,如復制酶、轉錄酶、U snRNP、hnRNP蛋白顆粒和細胞核內轉錄調節因子如Stat3等,以及其他需入核才發揮作用的外源性大分子如基因治療的外源重組DNA、病毒基因等;
相反,需出核轉運的生物大分子包括細胞核內各類RNA(rRNA、mRNA、tRNA)、(通派細胞庫供應:Intestine 407細胞株)U snRNP蛋白顆粒、NES蛋白等。
生物大分子正常的出入核轉運是真核細胞生長、(通派細胞庫供應:SBC-7細胞株)增殖、分化和發育等生命活動的基本保證。