細(xì)胞：KLE細(xì)胞

中文名稱(chēng)：人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞

生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞

培養(yǎng)基：F12K+10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

KLE細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作）

1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min）

2． 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。

3． 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；）

RNA毒性積累是導(dǎo)致C9orf72引發(fā)ALS和FTD這兩種疾病的原因

重復(fù)擴(kuò)張(指產(chǎn)生一前一后重復(fù)的RNA序列的額外版本的突變)是造成40多種遺傳疾病的原因，它們一般會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)問(wèn)題和神經(jīng)肌肉問(wèn)題。

C9orf72六核苷酸重復(fù)擴(kuò)張已被發(fā)現(xiàn)(通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：BT-549細(xì)胞)是造成“肌wei縮側(cè)索硬化"(ALS)和“額顳癡呆" (FTD)這兩種疾病的原因。正常的C9orf72含有多達(dá)25個(gè)重復(fù)片段，而患病者的該基因則會(huì)含有數(shù)千個(gè)。

研究中找出了六核苷酸重復(fù)擴(kuò)增(HRE)結(jié)構(gòu)多態(tài)性導(dǎo)致ALS / FTD的病理分子機(jī)制。（通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：U937細(xì)胞）HRE形成DNA和RNA的G-四鏈不同的結(jié)構(gòu)，促進(jìn)RNA DNA雜交(R-循環(huán))。

結(jié)構(gòu)多態(tài)性引起的轉(zhuǎn)錄終止的HRE區(qū)域的重復(fù)長(zhǎng)度依賴的積累。（通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：C2C12細(xì)胞）這些轉(zhuǎn)錄重復(fù)綁定到核糖核蛋白的構(gòu)象依賴性。

研究表明，（通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：6t-cem細(xì)胞 ）RNA毒性的增加在ALS/FTD兩種疾病中是造成與C9orf72相關(guān)病理的原因。

轉(zhuǎn)錄的C9orf72六核苷酸重復(fù)片段被發(fā)現(xiàn)以一種依賴于構(gòu)形的方式（通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：1301細(xì)胞）與特定的核糖核蛋白如核仁蛋白相結(jié)合；因此，核仁蛋白被錯(cuò)誤局部化，并且在功能上受損，導(dǎo)致“核仁應(yīng)激"。