細胞:KYSE410細胞
中文名稱:人食管癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:1640 培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
KYSE410細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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RNA聚合酶III調控巨噬細胞功能促進腫瘤存活
腫瘤微環境中的炎癥具有許多促癌癥發展效應。(通派細胞庫供應:HBL-100細胞)特別是腫瘤相關巨噬細胞(TAM)能夠產生許多細胞因子,促進惡性腫瘤細胞存活,血管生成以及轉移維持腫瘤生長。
腫瘤相關巨噬細胞內細胞因子的合成與蛋白質合成過程緊密相關,(通派細胞庫供應:CHL細胞)而蛋白質的翻譯過程又依賴于RNA聚合酶III轉錄形成的眾多tRNA。因此研究RNA聚合酶III對腫瘤相關巨噬細胞的功能發揮有何影響具有重要意義。
研究人員發現用來源于細菌細胞壁的脂多糖(LPS)刺激小鼠巨噬細胞能夠上調表達tRNA的相關基因的轉錄。(通派細胞庫供應:SW-13細胞)nf-kb是介導炎癥信號的一個關鍵轉錄因子,LPS處理能夠會增強NF-kB的p65亞基與tRNA基因的作用。
除此之外,(通派細胞庫供應:Dami細胞)研究人員還發現p65能夠直接與RNA聚合酶III復合物中的轉錄因子TFIIIB相互作用,并且p65過表達會誘導pol III依賴性的轉錄過程。
抑制巨噬細胞內的pol III活性能夠阻止巨噬細胞分泌細胞因子并抑制其吞噬作用,(通派細胞庫供應:Hel 92.1.7細胞)這也是巨噬細胞的兩個關鍵功能特征。
這項研究揭示了RNA聚合酶III對巨噬細胞功能的重要調控作用,(通派細胞庫供應:C127細胞)證明RNA聚合酶III可能對于惡性腫瘤細胞相關的免疫反應具有重要影響。