細胞:MA-782細胞
中文名稱:小鼠乳腺癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:L15+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
MA-782細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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TRAP-1缺失小鼠可重編程整個代謝網絡
在健康細胞中,TRAP-1是代謝的重要調節蛋白,并且已顯示出在調節線粒體能量生產中發揮的重要作用。在腫瘤細胞的線粒體中,TRAP-1是過量的。(通派細胞庫供應:A-673細胞)
研究創造了TRAP-1基因敲除小鼠,利用其來進行藥物Gamitrinib(其可靶定腫瘤細胞線粒體中的蛋白質)的研究。(通派細胞庫供應:NTERA-2細胞)
TRAP-1是熱休克90(HSP90)蛋白家族的一成員,腫瘤利用HSP90蛋白如TRAP-1,以幫助在治療下生存。在腫瘤中,TRAP-1的缺失是有重大后果的,會觸發包括代謝問題的災難性缺陷,最終導致腫瘤細胞死亡.(通派細胞庫供應:C-33 A細胞)
然而,一開始就缺少TRAP-1的小鼠在子宮內有三周時間來補償此蛋白質的缺失。(通派細胞庫供應:Calu-3細胞)研究發現,在他們的基因敲除小鼠中,TRAP-1的缺失會導致線粒體蛋白錯誤折疊,然后觸發代償性反應,導致細胞消耗更多的氧氣和代謝更多的糖。
這將導致基因敲除小鼠線粒體產生失調水平的ATP。線粒體活性的增加實際上會適度刺激氧化應激(自由基損傷)和相關的DNA損傷。(通派細胞庫供應:ES-2細胞)雖然DNA損傷似乎不利于長壽養生,但低程度DNA損傷實際上減少了細胞的增殖,減慢生長速度,使細胞的自然修復機制生效。
總之研究發現TRAP-1基因敲除小鼠表現出較少的與年齡相關的病癥包括肥胖,炎癥組織變性和自發形成的腫瘤等。