細(xì)胞:LoVo細(xì)胞
中文名稱:人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:F12K+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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這些細(xì)胞與ESC一樣,培養(yǎng)時生長不確定。一些細(xì)胞幾乎生長了兩年,仍保持著它們的特征,并沒有老化的信號。
假設(shè)在適當(dāng)?shù)臈l件下,MAPC就能轉(zhuǎn)化為無數(shù)組織類型:肌肉,軟骨,骨骼,肝臟和不同類型的神經(jīng)原和腦細(xì)胞。
小組還完成了評估細(xì)胞可塑性的黃金標(biāo)準(zhǔn)測試。她將從人類和小鼠中獲得的單個MAPC放入早期小鼠胚胎中。試驗(yàn)后,對出生小鼠的分析顯示單個MPAC與所有機(jī)體組織有關(guān)。
MPAC具有ESC的許多特性,但它們并不相同。例如將MPAC注射入成體,不會形成癌組織塊。如果這一點(diǎn)獲證實(shí)那么它將具有極大的潛力。
其間有一些基本問題必須回答。一就是MPAC是否確實(shí)能形成功能性細(xì)胞。
分化的干細(xì)胞會表達(dá)不同類型細(xì)胞所特_有的標(biāo)記。但是簡單地檢測標(biāo)記是不行的,就神經(jīng)組織而言,就不能證實(shí)干細(xì)胞確實(shí)已經(jīng)成為具有功能的神經(jīng)原。