細胞:LNCaP細胞
中文名稱:人前列腺癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:1640 培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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烷氧自由基氫遷移反應可以使特定位置的惰性碳氫鍵發生選擇性斷裂,從而實現區域與化學選擇性的碳氫官能化反應。
然而烷氧自由基發生氫遷移反應后主要生成氫化產物、氧化環化產物或碳雜鍵產物,無法高效地進行分子間的碳碳成鍵反應。該反應使用穩定的N-烷氧酞酰亞胺作為烷氧自由基前體,適用于活化及非活化C(sp3)-H碳氫鍵的官能化。
由于具有優秀的區域和化學選擇性,并且對雜環及炔烴等官能團具有很好的兼容性;該反應可以高選擇性地進行復雜分子膽固_醇的克級別后期修飾。同時該反應在水相中也可以順利進行,為進一步發展生物相容反應提供了有利條件。
醇是理想的烷氧自由基前體,然而由醇通過均裂的方法生成烷氧自由基在熱力學上需要較高的能量;在合成上比較困難,目前通常在過渡金屬活化和較強的氧化條件下將醇氧化產生烷氧自由基。
烷氧自由基導向的β斷裂可以選擇性地實現惰性C(sp3)-C(sp3)鍵切斷,進而產生酮及烷基自由基。然而目前烷氧自由基導向的β斷裂主要適用于張力環醇的研究,線性醇的碳碳鍵切斷十分困難。
該方法可以實現張力環醇和線性醇的碳碳鍵切斷及炔基化和烯基化反應;具有優秀的區域和化學選擇性,可以應用于復雜分子石膽酸及膽固_醇的后期修飾。