人胚腎細胞293細胞 酶免疫技術的分類
酶免疫技術是以酶標記的抗體或抗原為主要試劑的方法,是標記免疫技術的一種。近年來標記免疫技術飛速發展,應用不同標記物,根據不同原理、不同技術建立起來的檢測方法層出不窮,而方法的創建者往往給同類的方法以不同的名稱。因此確知某一方法屬于哪一類型,對該方法的正確理解有著重要意義。本節先敘述各種標記免疫技術的要點,然后介紹酶免疫技術的分類,這樣可以對酶免疫技術和其他非酶的標記免疫技術的各種類型有一個總的概念。
一、標記的免疫技術
人胚腎細胞293細胞 酶免疫技術的分類 免疫技術是利用抗原抗體反應進行的檢測方法,即應用制備好的特異性抗原或抗體作為試劑,以檢測標本中的相應抗體或抗原。它的特點是具有高度的特異性和敏感性。如將試劑抗原或試劑抗體用可以微量檢測的標記物(例如放射性核素、熒光素、酶等)進行標記,則在與標本中的相應抗體或抗原反應后,可以不必測定抗原抗體復合物本身,而測定復合物中的標記物,通過標記物的放大作用,進一步提高了免疫技術的敏感性。這種標記免疫技術一般分為兩類,一類用于組織切片或其他標本中抗原或抗體的定位,另一類用于液體標本中抗原或抗體的測定。前者屬于免疫組化技術(immunohistochemicaltechnique)范疇,后者則稱為免疫測定(immunoassay)。
人胚腎細胞293
人胚腎細胞APP-PS1
人腎皮質近曲小管上皮細胞HK-2
人胚腎上皮細胞HKC
人胚胎膀胱組織來源細胞CCC-HB-2
人胚腎細胞(SV40T基因修飾)293T/17
人胚腎細胞(293來源病毒包裝細胞)ΦA
人膀胱移行細胞癌SW 780
人二倍體細胞HEL
人胚腎上皮細胞系KiMA
人胚腎二倍體細胞HEL-1
人胚腎細胞(SV40T基因修飾)293T
人胚胎腎細胞(Asp-2基因修飾)FC33
人胚胎腎細胞(Rabll-FIP基因修飾)FIP293
人胚腎細胞(EBNA1基因修飾)293E
人胚腎細胞(SV40T和 EBNA1基因修飾細胞)293ET
人胚腎細胞(小鼠 MHCⅠ類分子 Kb基因修飾細胞)293KB
人胚腎細胞(Sars結構蛋白基因修飾)293 001A
人胚腎細胞(Sars結構蛋白基因修飾)293 001B
人胚腎細胞(Sars結構蛋白基因修飾)293sars181A
人胚腎細胞293FT
腺病毒轉化的人胚腎細胞AA V-293
人原胚腎轉化細胞293 Ad5
人腎癌 Wilms細胞G401
人腎上腺皮質癌細胞SW-13
人腎癌細胞A498
人膀胱癌細胞
人膀胱移行細胞癌J82
人腎上腺皮質腺癌細胞NCI-H295R
人腎上腺腺瘤細胞NCI-H205
人膀胱移行細胞癌細胞T24
人腎癌細胞769-P
人腎上腺癌細胞ACHN
人腎透明細胞癌細胞Caki-2
人膀胱癌細胞J82
人膀胱癌細胞5637(HTB-9)
人腎透明細胞癌細胞786-O
人腎上腺神經母細胞瘤細胞KP-N-NS
人腎癌細胞OS-RC-2
人膀胱移行細胞癌M-UC-3
人膀胱鱗癌細胞SCaBER
人腎透明細胞癌Caki-1
人膀胱移行細胞乳頭瘤細胞RT4
人腎細胞腺癌細胞769-P
人腦瘤細胞SF126
人腦瘤細胞SF763
人腦瘤細胞SF767
人絨癌細胞耐藥株JEG-3/VP16
耐 VP16絨癌細胞(IL-2基因修飾)JEG-3/VP16-IL-2
耐 VP16絨癌細胞(TNFα基因修飾)JEG-3-VP16-TNFa
人神經母細胞瘤細胞BE(2)-M17
人腦瘤細胞SF17
人腦星形膠質母細胞瘤細胞U-87 MG
人腦髓母細胞瘤細胞D283
人腦膠質瘤細胞HS 683
人膠質瘤細胞SHG-44
人神經上皮瘤細胞SK-N-MC
人神經母細胞瘤細胞SK-N-SH
人神經膠質細胞瘤細胞U251
人膠質母細胞瘤細胞A172
人神經母細胞瘤細胞SH-SY5Y
人神經母細胞瘤細胞IMR-32
首先被用作標記免疫技術中標記物的是熒光素。1941年Coons建立的熒光抗體技術(fluorescentantibodytechnique)使組織和細胞中抗原物質的定位成為可能。放射性核素作為標記物在免疫技術中的應用又開創了特異性的超微量測定。1956年Yalow和Berson建立的放射免疫測定(radioimmunoassay,RIA)很快普遍應用于體液中的激素、微量蛋白及藥物的測定。酶用作免疫技術標記物是從抗原定位開始的。1966年Nakene和Pierce利用酶使底物顯色的作用而得到與熒光抗體技術相似的結果。70年代初,酶標抗體技術開始應用于免疫測定,其后得到迅速發展。
人胚腎細胞293細胞 酶免疫技術的分類熒光抗體技術、放射免疫分析和酶免疫技術,即經典的三大標記技術,又可根據標記物是否為放射性物質分為放射性免疫測定和非放射性免疫測定兩大類。后者消除了應用放射性物質在測定中帶來的不便,受到使用者的歡迎,新的方法不斷出現。化學發光免疫技術和金免疫技術等得到很大的發展。這些方法已普遍應用于臨床檢測驗。
二、酶免疫技術的分類
酶免疫技術一般分成酶免疫組化技術和酶免疫測定兩大類。酶免疫組化技術與熒光抗體技術相似,酶標記抗體與組織切片上的抗原起反應,然后與酶底物作用,形成有色沉淀物,可以在普通光學顯微鏡下觀察。如酶作用的產物電子密度發生一定的改變,則可用電子顯微鏡觀察,稱為酶免疫電鏡技術。
酶免疫測定根據抗原抗體反應后是否需要分離結合的與游離的酶標記物而分為均相(homogenous)和異相(heterogenous)兩種類型,實際上所有的標記免疫測定均可分成這兩類。如以標記抗體檢測標本中的抗原為例,按照簡單的形式是在試劑抗體過量的情況下進行,其反應式如下:
Ab*+Ag→Ab*Ag+Ab*
Ab*Ag代表結合的標記物,Ab*為游離的標記物。如在抗原反應后,先把Ab*Ag與Ab*分離,然后測定Ab*Ag或Ab*中的標記物的量,從而推算出標本中的抗原量,這種方法稱為異相法。如在抗原抗體反應后Ab*Ag中的標記物*失去其特性,例如酶失去其活力,熒光物質不顯熒光,則不需要進行Ab*Ag與Ab*的分離,可以直接測定游離的Ab*量,從而推算出標本中的Ag含量,這種方法稱為均相法。
在異相法中,抗原和抗體如在液體中反應,分離游離和結合的標記物的方法有好多種。與放射免疫測定相類似的液相異相酶免疫技測定,在某些激素等定量測定中也有應用。但常用的酶免疫測定法為固相酶免疫測定。其特點是將抗原或抗體制成固相制劑,這樣在與標本中抗體或抗原反應后,只需經過固相的洗滌,就可以達到抗原抗體復合物與其他物質的分離,大大簡化了操作步驟。這種被稱為ELISA的檢測技術成為目前臨床檢驗中應用較廣的免疫測定方法。