細胞消化法 傳代培養
具體操作:
一. 傳代前準備:
1.預熱培養用液:把已經配制好的裝有培養液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。
2.用75%酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。
3.正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,細胞消化法 傳代培養 不僅便于操作而且可減少污染。
4.點燃酒精燈:注意火焰不能太小。
5.準備好將要使用的消毒后的空培養瓶,放入微波爐內高火,8分鐘再次消毒。
6.取出預熱好的培養用液:取出已經預熱好的培養用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內。
7.從培養箱內取出細胞:注意取出細胞時要旋緊瓶蓋,用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面,再在鏡下觀察細胞。
8.打開瓶口:將各瓶口一一打開,同時要在酒精燈上燒口消毒。
二.胰蛋白酶消化;
1.加入消化液:小心吸出舊培養液,用PBS清洗(沖洗),加入適量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以蓋住細胞,*消化溫度是37℃。
2. 顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度。
3.吸棄消化液加入培養液:棄去胰蛋白酶液,注意更換吸管,加入新鮮的培養液。
細胞株查詢:
ACHN 人腎癌細胞系(ACHN)
AGS 人胃腺癌細胞
AN3 CA 人子宮內膜腺癌細胞(AN3 CA)
Ana-1 小鼠巨噬細胞
Anglne 人卵巢癌細胞系(Anglne)
AR42J 胰腺細胞AR42J
AsPC-1 人轉移胰腺腺癌細胞
B82 鼠細胞系(B82)
B95-8 絨猴EBV轉化的白細胞
BALB/3T3 clone A31 小鼠胚胎成纖維細胞
Bcap-37 人乳腺癌細胞Bcap-37
Bel-7402 人肝癌細胞系(Bel-7402)
BEL-7404 人肝癌細胞
BEL-7405 人肝癌細胞
Bewo 人絨毛膜腫瘤細胞系(Bewo)
BGC-823 人胃腺癌細胞(低分化)
BHK-21 敘利亞倉鼠腎細胞系(BHK-21)
BI U-87 膀胱癌細胞(BI U-87)
BRL 大鼠肝細胞
BSC-1 猴腎細胞系(BSC-1)
BSG823 人胃癌BSG823
BT-474 [BT474] 人乳腺導管癌細胞
BT-549 人乳腺管癌細胞
BxPC-3 人原位胰腺腺癌細胞
C127 小鼠乳腺腫瘤細胞
C2C12 小鼠成肌細胞C2C12
C-33A 人子宮癌細胞C-33A
C3H/10T1/2, Clone 8 小鼠胚胎成纖維細胞
C6 大鼠膠質瘤細胞
C6/36 蚊子細胞(C6/36)
C8-D1A 鼠小腦細胞C8-D1A
Ca Ski 人宮頸癌腸轉移細胞
CA46 Burkitts淋巴瘤細胞系(CA46)
Caco-2 人結腸腺癌細胞
CaES-17 人食管癌細胞CaES-17
Caki-1 人腎透明細胞癌皮膚轉移細胞
Calu-3 人肺腺癌 (胸水)
Calu-6 人退行性癌細胞
Caov-3 人乳突狀卵巢腺癌細胞(Caov-3)
Caski 人宮頸上皮細胞癌(Caski)
CBRH-7919 大鼠肝癌細胞
CCD-1095Sk 人乳腺浸潤性導管癌旁皮膚細胞
CCRF-CEM [CCRF CEM] 人急性淋巴細胞白血病T淋巴細胞
CFPAC-1 人胰腺癌細胞
CGM1 人EB病毒轉化的B細胞
Chang liver 人張氏肝細胞
CHL 倉鼠肺細胞
CHMAS 人肥大細胞白血病細胞CHMAS
CHO/dhFr- 倉鼠卵巢細胞,二氫葉酸還原酶缺陷
CHO-K1 倉鼠卵巢細胞亞株
CHSE 鮭魚胚胎細胞CHSE
CIK 草魚腎臟細胞(CIK)
CNE 人鼻咽癌細胞CNE(低分化)
CNE2 鼻咽癌細胞CNE2
CoC1 人卵巢癌細胞系(CoC1)
CoC1/DDP CoC1細胞耐藥亞株(CoC1/DDP)
COLO 205 人結腸癌細胞
COLO-320 人結腸腺癌細胞
COS-1 非洲綠猴SV40轉化的腎細胞
COS-7 非洲綠猴SV40轉化的腎細胞
CRFK 貓腎細胞
CTLA4 Ig-24 中國倉鼠卵巢細胞
CV-1 [Part of the Wistar Special Collection] 非洲綠猴腎細胞
CW-2 人結腸腺癌細胞
Dami 人巨核細胞白血病細胞
Daudi 人成巨核細胞白血病細胞
DLD-1 人結直腸腺癌上皮細胞
DMS153 人小細胞肺癌DMS153
DT40 雞淋巴瘤細胞
DU 145 人前列腺癌細胞
EAC-E2G8 鼠腹水瘤(EAC-E2G8)
EBTr (NBL-4) 牛胚氣管細胞
Eca-109 人食道癌細胞Eca-109
ECV-304 人臍靜脈內皮細胞系(ECV-304)(具有T24細胞特性)
EL-4 小鼠淋巴瘤(EL-4)
EPC 鯉魚上皮細胞EPC
ES-2 人卵巢透明細胞癌
F56 人腺癌細胞系(F56)
F81 貓腎細胞
FaDu 人咽鱗癌細胞
FG 牙鲆細胞FG
菌種 :
粘質沙雷氏菌 Serratia marcescens
粘質賽氏桿菌 Serratia marcescens
粘質沙雷菌 Serratia marcescens
粘質沙雷氏菌 Serratia marcescens
無花果沙雷氏菌 Serratia ficaria
深海絲氨酸球菌 Serinicoccus profundi
反芻月形單胞菌反芻亞種
牛月形單胞菌 Selenomonas bovis
鮭色沉積物桿狀菌 Sediminibacterium salmoneum
嗜鹽沉積物桿菌 Sediminibacillus halophilus
白色沉積物桿菌 Sediminibacillus albus
罕見斯卡多維氏菌 Scardovia inopinatum
蘇氏血桿菌 Sanguibacter suarezii
土壤血桿菌 Sanguibacter soli
海血桿菌 Sanguibacter marinus
科氏血桿菌 Sanguibacter keddieii
菊粉血桿菌
考氏棲鹽水芽孢桿菌 Salsuginibacillus kocurii
嗜鹽棲鹽水芽孢桿菌 Salsuginibacillus halophilus
腸沙門氏菌腸亞種 Salmonella enterica subsp. enterica
肋生鹽弧菌肋生亞種 Salinivibrio costicola subsp. costicola
熱帶鹽水孢菌 Salinispora tropica
棲沙鹽水孢菌 Salinispora arenicola
土壤鹽坑微菌
玫瑰色鹽水球菌 Salinicoccus roseus
青島鹽水球菌 Salinicoccus qingdaoensis
昆明鹽水球菌 Salinicoccus kunmingensis
西班牙鹽水球菌 Salinicoccus hispanicus
耐鹽鹽水球菌 Salinicoccus halodurans
嗜堿鹽水球菌 Salinicoccus alkaliphilus
新疆鹽地桿菌 Salinibacterium xinjiangense
阿穆爾斯克灣鹽地桿菌 Salinibacterium amurskyense
康氏鹽漬芽孢桿菌 Salinibacillus kushnerii
艾丁湖鹽漬芽孢桿菌
嗜鹽鹽漬微菌 Salimicrobium halophilus
白色鹽漬微菌 Salimicrobium album
需鹽需鹽桿菌 Salegentibacter salegens
米氏需鹽桿菌 Salegentibacter mishustinae
海參需鹽桿菌 Salegentibacter holothuriorum
成鏈需鹽桿菌 Salegentibacter catena
新疆糖絲菌 Saccharothrix xinjiangensis
德克薩斯糖絲菌 Saccharothrix texasensis
丁香糖絲菌 Saccharothrix syringae
易變糖絲菌易變亞種 Saccharothrix mutabilis subsp. mutabilis
易變糖絲菌野山羊亞種 Saccharothrix mutabilis subsp. capreolus
長孢糖絲菌 Saccharothrix longispora
西班牙糖絲菌 Saccharothrix espanaensis
淡藍褐糖絲菌 Saccharothrix coeruleofusca
澳大利亞糖絲菌 Saccharothrix australiensis
塔氏糖多孢菌 Saccharopolyspora taberi
針脊孢糖多孢菌 Saccharopolyspora spinosporotrichia
刺糖多孢菌 Saccharopolyspora spinosa
山東糖多孢菌 Saccharopolyspora shandongensis
直桿糖多孢菌 Saccharopolyspora rectivirgula
江西糖多孢菌