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人非小細胞肺癌細胞H125細胞

時間:2014/11/24閱讀:1044
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人非小細胞肺癌細胞H125細胞

一、放射自顯影
1.把干燥的凝膠或印跡緊密貼放在X-射線膠片乳膠層上。Kodak XAR或Fuji RX膠片比較合適。帶有14C或35S標記的印跡或樣品必須按正確的方向把正面貼在膠片上以保證充分曝光。
2.在室溫下置于一個密封蔽光的容器中適當時間。
3.根據制造商推薦的方法操作。
二、PPO熒光顯影
PPO-浸潤凝膠  
1.電泳后或染色后,把凝膠放入脫色劑(7%冰醋酸,25%甲醇)振蕩30分鐘。小心倒掉脫色劑、DMSO廢液并去掉多余水分。加入5倍凝膠體積的DMSO廢液。
2.試問下振蕩45分鐘,去掉DMSO廢液,再加入5倍凝膠體積的新鮮DMSO。
3。室溫下振蕩45分鐘,把DMSO導入DMSO廢液貯存器,在DMSO中加入5倍凝膠體積的22%PPO。
4.試問下振蕩45分鐘,把PPO/DMSO倒回貯液器,作為日常工作,這個溶液可再次使用(一個帶有35S的甲硫氨酸的500ml原液可供使用。
5.那PPO浸潤的凝膠放在緩緩流動的水中,當PPO擴散出來是,凝膠立即變白。
6.用新鮮的水流輕輕沖洗30分鐘到一個小時,取出凝膠并按常法干燥。
7.把凝膠或印跡緊密貼在X射線膠片乳化層上。
8.置于一個-70攝氏度的密封蔽光的容器中適當時間。
9.根據儀器制造商上海通派生物科技有限公司推薦的方法操作。
注意事項
如果凝膠上蛋白質使用的是3H放射標記同位素,膠片應預先曝光以便在放射性衰變與膠片變黑程度間保持一個線性關系。
有一些公司供應商品話的PPO替代物 它們使用方便,但比PPO要貴許多。
用增感屏
1.把一張X-射線膠片放在烏酸鈣增感屏上。然后把凝膠或印跡正確貼放在膠片乳膠層上。
2.置于一個-70攝氏度的密封、蔽光的容器里適當時間。
3.按供應商的說明操作。

 

人胚肺成纖維細胞MRC-5  
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人胚胎氣管組織來源細胞CCC-HBE-2  
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人肺細胞HLF-a  
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人胚肺二倍體細胞HEL-1  
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人胚肺轉化細胞SL-1  
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