DIY夾心法ELISA試劑盒常見技術指南：
1、選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對；若選擇兩個單抗，必須識別不同表位的抗體；從同一家公司選擇抗體對。
2、ELISA試劑盒實驗中為了確定*信號和zui低背景應將捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測抗體（0.25-2μg/ml）在預實驗中進行彼此相抗的滴定。同時，應包括在適當范圍內的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規提供的范圍進行操作。
3、標準品的配制：對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書，注意每批的細節。在使用細胞因子前，瞬時離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細胞因子。根據每批說明書中的細節，將凍干的細胞因子復溶。
4、一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml。可利用標準的ELISA試劑盒操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統可在一定范圍內提高靈敏度。
5、為了優化靈敏度，建議過夜孵育標準品和標本。
6、若使用過氧化物酶作為顯色系統，應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
7、當測定混合液體中的抗原時，如血清，建議在標本稀釋液中加不相干的Ig.Galectin 1    半乳糖凝集素1抗體
ICOS/CD278    誘導協同刺激分子CD278抗體
IL-31    白細胞介素31抗體
IL-28A/IFNL2    白細胞介素28A抗體
IL-32/NK4    白介素32抗體
IL-33/NFHEV    白介素33抗體
ILT2/CD85j    細胞表面免疫球蛋白樣轉錄因子2抗體
Integrin alpha 2/CD49b    整合素α2抗體
Integrin alpha 2b/CD41    血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗體
IL-17RC/IL-17RL    白介素17受體C抗體
IGSF8    免疫球蛋超家族成員8抗體
IL-33    白介素33抗體
Importin 9    核蛋白9抗體（Ran結合蛋白M）
eIF3A    真核翻譯起始因子3A抗體
phospho-eIF4G (ser1185)    磷酸化真核翻譯起始因子4G抗體
Integrin alpha 4+Beta 7    整合素α4β7抗體
phospho-IRF3 (Ser386)    磷酸化干擾素調節因子3抗體
ISLR2    ISLR2蛋白抗體