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96T/48T小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α (sm Actinin-α)ELISA試劑盒 操作步驟:
1.從已平衡至室溫的密封袋中取出試驗(yàn)所需板條,未用的板條和干燥劑請(qǐng)放回鋁箔袋內(nèi)封存于2-8℃。
2.預(yù)留空白孔(若使用雙波長讀板,空白孔可以不設(shè))。
3.分別將標(biāo)本或不同濃度人IL-2標(biāo)準(zhǔn)品(0pg/ml孔加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液)加入相應(yīng)孔中(100μl/孔),用封板膠紙封住反應(yīng)孔,37℃孵箱孵育90分鐘。
4.提前30分鐘制備生物素化人IL-2抗體工作液。
5.洗板3次。
6.加入生物素化人IL-2抗體工作液(100μl/孔)。用封板膠紙封住反應(yīng)孔,37℃孵箱孵育60分鐘。
7.提前30分鐘制備酶結(jié)合物工作液。室溫避光放置。
8.洗板3次。
9.除空白孔外,加入酶結(jié)合物工作液(100μl/孔)。用封板膠紙封住反應(yīng)孔,37℃孵箱,避光孵育30分鐘。
10.洗板5次。
11.加入TMB顯色工作液(包括空白孔)100μl/孔,37℃孵箱,避光孵育,當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)曲線高濃度的顏色較深,有明顯的顏色梯度的時(shí)候,即可終止。試驗(yàn)顯色反應(yīng)請(qǐng)勿超過30分鐘。
12.加入終止液(包括空白孔)100μl/孔,混勻后即刻測量OD(450nm)值(10分鐘內(nèi))。
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