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ELISA試劑盒實驗如何必免吸光度值發生衰減

時間:2019/3/22閱讀:719
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在操作ELISA試劑盒實驗的時候加完顯色液(顯色一定時間后,再加終止液后,立即測試其吸光度值,等過幾分鐘再測試吸光度值,發現兩次測得的吸光度值發生衰減。第二次均小于次。并且,加終止液時,從1加到第12條后,測試發現,吸光度值從1-12條逐級衰減。

有可能是顯色液的質量不夠好。一般情況下,終止反應后OD值的下降前期不是很明顯。終止后,吸光度值是會隨著時間衰減,所以一般是加完終止液后立即測,這樣比較準。

再次分析12條顯示逐級遞減的原因看看是否是:

① 顯色時間調整,如果您現在的顯色時間是10MIN,那調整到30MIN,再加終止液,觀察上述現象是否出現。

② 終止液中加入少量甘油看下怎么樣。

ELISA試劑盒顯色時間是30分鐘,終止后要求在30分鐘內檢測,加入終止液后,在加入終止液后2到3分終內檢測,這是OD值相對比較高。擬合值能達到四個9。 

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