上海邦景ELISA試劑盒的優(yōu)點及說明

上海邦景有限公司是一家專注于生物的技術(shù)企業(yè)，學(xué) ELISA試劑盒等生物科技實驗需求。目前很多客戶因為對品牌的信任度問題，公司仍然是一個非常好的選擇上海邦景LISA試劑盒，是 你*。 通常人們使用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA實驗，雙抗夾心法中抗原被夾在捕獲抗體和檢測抗體之間，這種方法既靈敏又有效，受到了許多研究者的青睞。不過有時候雙抗夾心法并不是*選擇，例如有時候抗原特別小讓兩個大抗體難以附著，又或者抗體只有一個抗體結(jié)合位點。在上述情況下，競爭性ELISA就更為適用，這種方法是采用帶標(biāo)記的純化抗原與樣本中無標(biāo)記的抗原進(jìn)行競爭，以結(jié)合捕獲抗體。

抗體類型

單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于ELISA，實際上有時候二者結(jié)合效果更好。例如，對于雙抗夾心法而言，用多抗進(jìn)行捕獲而單抗進(jìn)行檢測有時更有幫助。多抗能夠確保捕獲所有抗原，隨后單抗再特異性檢測擁有特定抗原表位的抗原。

雙抗夾心法ELISA中捕獲抗體與檢測抗體(不論多抗還是單抗)的配對很有講究。我們不希望捕獲抗體與檢測抗體競爭抗原上的同一位點，為此我們就需要確保捕獲抗體和檢測抗體所識別的抗原表位不存在重疊。如果捕獲抗體和檢測抗體之間發(fā)生了突，就會對實驗結(jié)果產(chǎn)生較大影響。要避免這一問題，我們可以選擇購買 “matched pair”的捕獲/檢測抗體對，這些打包在一起的抗體是商家經(jīng)過驗證才推薦的好組合，

交叉反應(yīng)

如果抗體間發(fā)生沖突或交叉反應(yīng)就會影響整個實驗的特異性。其中抗體來源所帶來的兼容性就是交叉反應(yīng)的一個因素。盡管現(xiàn)在購買源自動物的抗體越來越容易，我們?nèi)杂斜匾_認(rèn)一下是否會產(chǎn)生交叉反應(yīng)的問題。在用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA檢測時，檢測用的二抗必須特異性針對檢測一抗，而不能與捕獲抗體起反應(yīng)。如果檢測用二抗與捕獲抗體結(jié)合，實驗特異性就會大打折扣。通常我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測一抗，來避免上述問題。與此同時，了解試劑盒中提供的buffer也是有必要的(例如washing buffer和blocking buffer)，以免這些buffer含有可能影響抗原抗體相互作用的組分，使檢測結(jié)果收到影響。

檢測方式

如今檢測ELISA有許多途徑，我們可以根據(jù)自己的偏好進(jìn)行選擇。一般ELISA檢測的是酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)物，抗體上結(jié)合有相應(yīng)的酶(例如通常使用的辣根過氧化物酶HRP)，而反應(yīng)體系中添加有相應(yīng)的底物(如3，3-二氨基聯(lián)苯胺DAB)。這種酶促反應(yīng)生成具有特征性的

顏色，可以通過分光光度計進(jìn)行檢測，堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。酶可以結(jié)合在一抗上，也可以結(jié)合在二抗上，還可以使用鏈霉親和素標(biāo)記的酶與親和素標(biāo)記的一抗結(jié)合。此外ELISA的結(jié)果檢測還包括放射性檢測、熒光檢測、化學(xué)發(fā)光或顯色法檢測等。

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