看似簡略的ELISA試驗在操作進程中稍有不合理的當地，會形成許多問題，影響檢測精度，下降測驗質量。這就要求咱們在試驗進程多做總結，逐步完善，挑選ELISA試驗各項過程中的要點之重。   
第一：包衣液的挑選   
碳酸鹽緩沖液一般挑選9。6。但有時因為測驗需求，數據包緩沖溶液是一種特別的原料可采用中性包裝。應留意以下原則：蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結合，取決于在固相的疏水性基團和疏水性相互作用的載體外表蛋白分子的結構，物理吸附對錯特異性的，蛋白分子量，等電點，大集中，小分子蛋白蛋白質一般含有疏水基團越多，所以更簡單吸附在固相載體外表。測驗也有很強的理論于實踐，看zui終一個能夠應用到咱們的測驗。除了方才說到的9。6碳酸鹽緩沖液常用的涂料溶液，和磷酸鹽緩沖液和7-8 7。2 -緩沖。   
第二：關閉   
以下包之后是無關的蛋白質溶液濃度高，涂層工藝。隨函附上使很多不相關的蛋白質充填這些空地，和攪擾物質的免疫排斥和吸附過程。elisa試劑盒常用的密封：0。05% - 0。5%牛血清白蛋白；10%或1%明膠牛血清；脫脂奶粉，價格相對低價，可用于高濃度(5%～10%)；和一些稀有的使用各種動物血清(首要是為了消除相似的蛋白和酪蛋白等攪擾)。但究竟挑選什么，依據試驗的詳細實踐。   
第三：洗板   
能夠說，在中操作，清洗是在首要的關鍵技術。因為聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍存在的，為了完成自在酶與客觀相結合的符號的別離，在板料孔中殘留游離和吸附的非特異性攪擾物質的去除，洗刷，并應將攪擾物質洗刷下來的非特異性吸附。所以在洗衣板會有必定的差錯，非常人的要素(當然也有洗衣機除條件)，是不完整的或弦清孔，系統的影響是如此靈敏，但不小。
第四：加抗體(抗標本和兩個)   
留意的槍頭，槍頭。樣品用稀釋稀釋，也能夠用稀釋的閉解。假如要增加兩個電阻，但也要留意兩個反作業濃度的廢物，太高，太低的光的光彩。