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收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2 培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中
靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125% yi 蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下
觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*
培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;
4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
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